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- 上海研生
- YS-C3871
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- 2026年01月24日
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- 供应商：
上海研生
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27
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详见说明书
资源名称 bast72说明书
种属 乳腺癌耐药细胞
形态 上皮细胞样
培养方法
培养基 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
生长特性 贴壁生长
详细说明
描述 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。
传代情况 C5
支原体检测 阴性
运输和保存：
bast72说明书视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
培养细胞冻存方案：
bast72说明书以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
HPLC≥98%FOS 样原2检测试盒20mgTPMT HPLC≥98%凝血质控血浆，正常5mgSVA
HPLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试盒ISI1.0-1.2<含复溶液>5mgADAMTS-13Ab
Bub3英文名称：ALS2CR4小鼠α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)免疫试剂盒
HPLC≥98%凝血质控血浆，异常5mg5,6-EET
HPLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试盒ISI1.2-1.4<含复溶液>5mgLeucine
BHLHB9/p60TRP英文名称：alpha 2 Macroglobulin小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)免疫试剂盒
HPLC≥98%凝血质控血浆，非常异常5mg8,9-EET
HPLC≥98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试盒<鞣花含Cacl2>5mgIle
NGF-R(p75NTR)英文名称：ZNF415生长停滞特异性蛋白2家族1抗体
bast72说明书细胞培养级，85%98%100mgTPI
Phospho-NFKB1(Ser893) 化细胞核因子p50/k因结合核因子体进口/国产CCDC22 卷曲螺旋结构域蛋白22体
VEGF英文名称：SLC34A2FRA2/FOSL2抗体
细胞培养级，85%98%25mgSBPase
NFkB p100/p52 细胞核因子p100/p52k因结合核因子体进口/国产CCDC25 卷曲螺旋结构域蛋白25体
VEGFR1英文名称：SORBS2叉头蛋白P3抗体
MIDN 中核仁蛋白体进口/国产Cyclin J 周期J体
NGFR/p75NTR 神经生长因子受体体进口/国产CCDC28A 卷曲螺旋结构域蛋白28A体
VEGFR2英文名称：Sialoadhesin成纤维细胞生长因子8抗体
具体操作：
1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液：大鼠主动脉平滑肌细胞取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人热休克蛋白72 ( HSP72 )ELISA 试剂盒 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 HSP72 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 HSP72与单抗结合，加入生物素化的抗人 HSP72 ，形成免疫复合物连接在板上，辣根
CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
%；2. 72 h 后收集细胞提取基因组 DNA（按照基因组 DNA 提取试剂盒的说明书操作）；3. 使用事先设计好的引物进行 PCR 扩增，这里使用的酶是 NEB 公司的 Q5 high-fidelity Polymerase，一切按照该酶的说明书严格操作；4. 将目的条带切割下来并使用胶回收试剂盒回收 DNA 条带，一切按照胶回收试剂盒说明书进行操作；5. 回收后的 DNA 样本，经 T7 Endonuclease I 酶解验证错配 DNA，部分结果如下：T7 EI验证成功，开始正式实验时间飞逝，上次说
我要检测一个受体蛋白，提取的脑组织，Trizol提取组织RNA，加异丙醇离心后能见到明显的沉淀，按照TakaRa 的RNA LA PCR KIT(AMV) VER.1.1说明书操作，在逆转录后PCR不再加dNTP。逆转录后PCR用actin引物能模糊扩出一些东西，但有两条以上的带(第二次都快扩成100bpMARKER了！）。目的片段干干净净什么都没有！目的片断的引物一个是外国文献上的，一个 是自己设计的，都没有扩出来。 小弟还菜，想大家给点建议，体系、PCR过程、胶图如下： 逆转
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