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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
2× Fast PfuMax Green HiFi PCR ProMix
- 保质期:
二年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1mL/5mL
产品概述
本产品包含 PfuMax HiFi DNA聚合酶、延伸促进因子、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂,扩增速度可达15 s/kb,可实现超快速PCR,长度在1kb以内的片段极限扩增速度更是可达1 s/kb,大幅节省PCR反应时间。同时本产品预先配制的2× Fast PfuMax Green HiFi PCR ProMix,只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了移液操作,提高了通量和结果的重现性,并且在反应结束后可直接进行电泳。体系中加入的保护剂使得产品经过反复冻融后仍可保持稳定的活性,扩增产物为平端。
产品内容
| 组分 | YB115A | YB115B |
| 2× Fast PfuMax Green HiFi PCR ProMix | 1 mL | 1 mL× 5 |
产品优势
- 扩增速度快:15 s/kb,1 kb以内极限扩增速度可达1 s/kb
- 简便:除了引物和模板之外的PCR组分都包含在预混液中,简化了配液流程,同时产物含有染料可直接进行电泳
- 稳定性高:反复冻融30次、4℃状态下保存1个月对品质没有影响
实验案例
1. 高速PCR实验
以人基因组为模板进行超快速PCR扩增,扩增1kb以下的目标片段时延伸时间设为1 s/kb,1 kb以上的目标片段时按15 s/kb设定可以得到清晰的条带。
2. 不同模板的快速扩增
以人基因组DNA、人宫颈癌cDNA、鼠基因组DNA、菌液、λDNA、小麦基因组DNA分别为模板对目标片段进行扩增,扩增1 kb以下的目的片段时延伸时间设为1 s/kb,1kb以上的目的片段时按15 s/kb设定。
应用范围
快速PCR;超保真PCR;困难PCR;平末端克隆
产品存储
-20℃保存
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文献和实验Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
TaqMan@探针和分子信标,利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加;一类为非探针类,其中包括如 SYBR@Green I 或者特殊设计的引物(如 LUX @Primers ) 通过荧光染料来指示产物的增加。 3.1 Taqman@探针法 Taqman@探针是最早用于定量的方法。就在 PCR 扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸:5’端标记一个报告荧光基团,3’端标记一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,也就是 FRET 反应
Real-time qPCR手册---手把手教你从菜鸟到高手
为“BioTeke”,进行“定量”实验。 B. 实验方法的选择:我们选用的比较Ct的SYBR Green方法, Fast程序,以cDNA为模板进行。 C. 目的基因的设置:有几个目的基因和目的基因的名称。 D. 样品的设置:包括哪个是实验组,哪个是对照组。以及负对照的设置和生物重复的设置。 E. 对照组和内参基因的设置:这个是为后面的定量做准备 F. 反应程序的设置:PCR反应程序的设置要根据不同公司的MasterMix。比如BioTeke的95℃ 2分钟就可以激活DNA聚合酶(ABI的需要
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡,校正加样误差或者是孔与孔之间的误差,提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系,也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲,real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样,要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间,所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法,最好在PCR扩增程序结束
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