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- 2025年10月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃/-80℃
- 保质期：
3个月/12个月以上
- 英文名：
BJ5183
- 库存：
14
- 供应商：
上海禾午生物科技有限公司
- 规格：
300μl
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文献和实验Generation of Recombinant Adenovirus Using the Escherichia coli BJ5183 Recombination System
here uses homologous recombination machinery of Escherichia coli BJ5183 to construct plasmids used in generation of adenoviral vectors. With this method, no ligation steps are involved in generating the plasmids, and any region of the adenoviral genome
（细菌内同源重组AdEasy System）一、目的基因的克隆（以pshuttle-CMV质粒为例）步骤1、选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2、重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。3、重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4、用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。5、胶回收线性化质粒，以备共转化使用。二、共转化 1、大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 （1）从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB
用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。 5. 胶回收线性化质粒，以备共转化使用。 二 共转化 1 大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 ² 从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB培养基中，37℃振摇过夜。 ² 接种25ml过夜培养物于500ml LB培养基，37℃振摇，至OD600 达到0.4。 ² 迅速将培养物置于冰浴中30min，至充分冷却。 ²
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