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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
KM71
- 库存:
20
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
500ul甘油菌
基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 菌株类型: | 毕赤酵母 |
| 培养基: | YPD培养基 |
| 生长条件: | 28-30 ℃, 有氧 |
| 基因型: | arg4 his4 aox1::ARG4 |
| 表型: | MutS, Arg+ |
| 抗性: | 氨苄和卡那 |
| 质粒转化条件: | 电转 |
| 应用: | 蛋白表达 |
| 诱导方法: | 甲醇 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| AT1028 | KM71 | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
KM71是毕赤酵母菌株,属于真核细胞。一般的针对原核生物的抗生素例如卡那和氨苄对酵母是无效的,因此为了防止大肠杆菌等原核生物对酵母培养菌株污染,往往会在培养基中加入一些氨苄和卡那霉素的抗生素,来抑制细菌菌的污染和生长。
KM71毕赤酵母自身表型为MutS,所以KM71转化株只能产生出His+MutS菌株。
毕赤酵母适宜的生长温度是28至30度,一般可以设置在30度培养,温度超过32度对蛋白的表达是有害的,并可能导致细胞的死亡。
KM71毕赤酵母是是组氨酸缺陷型(His4基因型),如果表达载体上携带有组氨酸基因,可补偿宿主菌的组氨酸缺陷,因此可以在不含组氨酸的培养基上筛选转化子。这些受体菌自发突变为组氨酸野生型的概率一般低于10-8。
KM71毕赤酵母可以在YPD培养基中生长,或者在补充有组氨酸的minimal media中生长,但是无法在单独的minimal media培养基中生长。
1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项:
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时与我司销售联系或更换新的菌种。
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