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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
BL21trxB(DE3)
- 库存:
18
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
300ul/株
产品信息:
| 货号 | 名称 | 产品形式 | 规格 | 储存 |
| A0008 | BL21trxB(DE3) Strain | 甘油菌 | 300μl | -20℃ |
使用说明:
康朗质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其他详细信息请登录我司官网联系QQ客服查询。
基因型:
F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm trxB15::kan(DE3)
基本信息:
抗性:Kan
培养基:LB
菌株类别:大肠杆菌
培养条件:37℃,有氧,LB
质粒转化:42℃热激
保存方式:20%甘油,-20℃
基本应用:用于蛋白表达
备注:
菌株简介:
BL21 Trxb (DE3)菌株是常用的重组蛋白表达大肠杆菌菌株,可用37℃,LB,有氧的方式培养,该菌株有利于目的蛋白二硫键在细胞质中的形成,能有效提高含二硫键蛋白的正确折叠和表达。BL21 Trxb宿主菌拥有与AD494菌株相同的硫氧还蛋白还原酶突变体(thioredoxin reductase mutation,Trxb)突变体。该菌株来源于BL21菌株。由于含有Trxb蛋白的宿主菌能够有效提高细胞质内二硫键形成,他们能够提高目的蛋白的 正确折叠率。该宿主菌具有卡那霉素抗性,所以这个菌株只能用于氨苄霉素抗性的质粒表达。DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可,也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。
菌种培养及打管说明:
1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项:
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时与我司销售联系或更换新的菌种。
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文献和实验): Transformation efficiency: 0.6-1 x 109 cfu/µg pUC19 DNA(这可是BL21(DE3)系列的10(6)的效率所不能比拟的,做库的时候非常有用) T7 RNA Polymerase in the lac operon - no lambda prophage(lambda prophage虽然在细菌的基因组中,但实际上是比较不稳定的,在应激的条件下,可能破坏表达菌的基因组。) Tight control of expression by lacIq allow
【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)
的生产任务”——因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的,当出现问题时,我们需要经验判断问题所在。宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢? 知其然还要知其所以然。比如,菌株内源的蛋白酶过多,可能会造成外源表达产物的不稳定,所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成为理想的起始表达菌株。堪称经典的BL21系列就是lon和ompT蛋白酶缺陷型,也是我们非常熟悉的表达菌株。大名鼎鼎的BL21(DE3)融源菌则是添加T7聚合酶基因,为T7表达系统而设计。 真核细胞偏爱的密码子和原核系统有不同,因此,在用原核系统
(三)菌株 工程菌BL21(DE3)pET-32a和工程菌BL21(DE3)p32aGFPuv。 【操作方法】 1.分别挑取工程菌BL21(DE3)pET-32a和BL21(DE3)p32aGFPuv的单菌落接种到5mLLB液体培养基(含氨苄,终浓度为100μg/mL,以下同)。 2.于37℃、250r/min培养
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