ATCC CCL-213(Daudi)人淋巴瘤细胞

细胞名称:        ATCC CCL-213(Daudi)人淋巴瘤细胞
种属来源:        人
组织来源:        外周血；B淋巴母细胞
疾病特征:        Burkitt's淋巴瘤
细胞形态:        淋巴母细胞样
生长特性:        悬浮生长
培 养 基:        RPMI-1640 90%；FBS，10%。
生长条件:        气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,
传代方法:        1：2至1：6，每周2次。
冻存条件:         90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存
支原体检测:        阴性
安全等级:        2
应    用:        该细胞被广泛应用在白血病的发病机制研究。
该细胞可以作为转染宿主细胞。
STR:
Amelogenin: X,Y
CSF1PO: 12
D13S317: 11,12
D16S539: 10,12
D5S818: 8,13
D7S820: 8,10
THO1: 6,7
TPOX: 8,11
vWA: 15,17
同工酶:
G6PD, B
备注:
Nucleotide (GenBank) : U07990 Human Burkitt's lymphoma immunoglobulin kappa light chain mRNA, partial cds.
Nucleotide (GenBank) : U07987 Human Burkitt's lymphoma immunoglobulin IgM heavy chain Fd fragment mRNA, partial cds.
参考文献:
Ohsugi Y, et al. Tumorigenicity of human malignant lymphoblasts: comparative study with unmanipulated nude mice, antilymphocyte serum-treated nude mice, and X- irradiated nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 65: 715-718, 1980. PubMed: 6932523
Klein E, et al. Surface IgM-kappa specificity on a Burkitt lymphoma cell in vivo and in derived culture lines. Cancer Res. 28: 1300-1310, 1968. PubMed: 4174339
Huber C, et al. Surface receptors on human haematopoietic cell lines. Clin. Exp. Immunol. 25: 367-378, 1976. PubMed: 963908
Nilsson K, et al. Tumorigenicity of human hematopoietic cell lines in athymic nude mice. Int. J. Cancer 19: 337-344, 1977. PubMed: 14896
Gao Y, et al. Induction of an exceptionally high-level, nontranslated, Epstein-Barr virus-encoded polyadenylated transcript in the uurkitts lymphoma line Daudi. J. Virol. 71: 84-94, 1997. PubMed: 8985326

特点和简介
ATCC CCL-213(Daudi)人淋巴瘤细胞1967年五月E. Klein and G. Klein从一位16岁黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者建立了Daudi细胞株。 表面免疫球蛋白阳性(sIg+)。Β2-微球蛋白阴性，EBNA阳性，并有衣壳抗原VCA。细胞株携带EB病毒。 Daudi是典型的B淋巴母细胞，广泛应用于白血病发生机理的研究。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。

接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

ATCC CCL-213(Daudi)人淋巴瘤细胞培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。