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- 上海研生
- YS-C3063
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- 2025年12月23日
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上海研生
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39
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详见说明书
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
资源名称 SK-MEL-28说明书
种属 人恶性黑色素瘤细胞
提供形式 P4-5代T25培养瓶细胞
培养方法
培养基 90%高糖DMEM+10%FBS
生长条件 95%空气+5%二氧化碳37摄氏度
生长特性 贴壁生长
存储条件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
详细说明
细胞培养的优点：
1.SK-MEL-28说明书研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
收到SK-MEL-28说明书如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
人细胞色素P450家族成员24A1(CYP24A1)酶联免疫吸附测定试剂盒 100MG
阿立相关物质G标准品 CAS: 进口、国产 25mg
替米星 质量≥595 µg/mg,BR Netilmicin Sulfate 心浸液琼脂/心浸液琼脂/BHI琼脂/BHI Agar用于培养各种细250克国产/进口
人纤维胶凝蛋白1(FCN1)酶联免疫吸附测定试剂盒 100mg
阿散标准品 CAS: 98- Arsanilic Acid 进口、国产 25mg
4,4'-滴滴滴(标准品) 质量分析标准品 p, p’-DDD 小鼠腮细胞完全培养100mL
人抗髓磷脂抗体IgA(AMA IgA)酶联免疫吸附测定试剂盒 1g
EM2 Others Mouse 小鼠 EM2 人细胞裂解液 (阳性对照)
去二愈创木 订购|咨询 HPLC≥98%;20mg 心钠体 SAA3 ELISA Kit 血清淀粉样蛋白A3(SAA3)ELISA试盒
SK-MEL-28说明书HPLC≥98%Apelin ELISA试盒5mgACCA
英文名称标准品猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit，48T/96T 500mg
BADH2英文名称：ASB10小鼠白介素15(IL-15)免疫试剂盒
HPLC≥98%Apelin 36检测试盒5mgAMCA
英文名称标准品大鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit，48T/96T 150mg
BCHE(1E8)英文名称：ALDH1L1小鼠白介素13(IL-13)免疫试剂盒
HPLC≥98%apelin 13检测试盒5mgZAL
英文名称标准品兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit，48T/96T 15mg
phospho-beta catenin (Tyr142)英文名称：Axin 2小鼠白介素12(IL-12/P70)免疫试剂盒
公司优势：
1.具有多年的销售经验和资深的行业背景，我司秉承质量优先的理念，重视自主创新，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；
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文献和实验人粘膜相关上皮趋化因子(CCL28)ELISA试剂盒 说明书
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人 粘膜相关上皮趋化因子 ( CCL28 )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 CCL28/MEC单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 CCL28与单抗结合，加入生物
Sucrose Density Gradient Fractionation
below).Resuspend in 10 ml SK with 1 mg zymolyase and 28.8 mM Beta-mercaptoethanol to make SK:thaw zymolyase (kept at 5 mg/ml stock in SK at -20℃)at room temp,then spin 1 min at 14,000 rpm.Take supe.-- for 4 gradients,use 900μl of supe,90μl of beta-mercaptoethanol
Sucrose Density Gradient Fractionation of Yeast Membranes
., 10 min., 30oC in lab clinical centrifuge Wash 1x with 10 ml SK buffer in 15 ml falcon tubes (see recipe below). Resuspend in 10 ml SK with 1 mg zymolyase and 28.8 mM Beta-mercaptoethanol to make SK: thaw zymolyase (kept at 5 mg/ml
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