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- JLCXB768
- 国内
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存：
14
种属来源: 人
组织来源: 肾
疾病特征: 肾上腺神经母细胞瘤
细胞形态: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
培 养 基: RPMI-1640，90%；FBS，10%。
生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,
传代方法: 1：2至1：6，每周2次。
冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存
支原体检测: 阴性
特点和简介
源自脑转移灶的肾上腺神经母细胞瘤。
接受后处理
1) 收到KP-N-NS人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻存管做标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储 存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项
1.收到细胞后首先观察细胞瓶是否完，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及时和我们联系。
2.仔细阅读细胞说明书，了解KP-N-NS人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3.用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4.静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇合度 80%左右时正常传代。
5.请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6.建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术 部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
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文献和实验① Nature：揭示乳腺癌向大脑转移新机制乳腺癌脑转移（breast-to-brain metastases, B2BM）的高发生率使得科学家们猜测乳腺癌细胞向大脑中迁移并播种肿瘤是有内在原因的。阐明这一内在原因可能会为我们提供最大程度地减少甚至完全阻止 B2BM 的手段。在一项新的研究中，来自瑞士洛桑联邦理工学院（EPFL）下属的瑞士实验癌症研究所（ISREC）的研究人员发现 B2BM 涉及 N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR），该受体存在于神经元的细胞膜上，并且参与传播神经
阐明了软脑膜微环境中免疫细胞与肿瘤细胞的复杂互作机制，揭示了 IFN-γ在中枢神经系统（CNS）中独特的免疫调节功能，为理解 LM 的免疫逃逸机制提供了全新视角。此外，研究结果为开发 LM 新型免疫治疗策略奠定了理论基础，尤其是基于树突状细胞（DCs）和 NK 细胞的靶向疗法，有望为改善 LM 患者预后提供新的干预方向。 案例二：单细胞技术解析泛癌脑转移关键特征 发表期刊：Cancer Cell 影响因子：44.5 发表时间：2025 年 4 月 研究疾病：泛癌 样本类型：癌
了 3.8 倍，反映了大脑中转移瘤的数量。 综上，这些数据表明，添加 NR 会导致癌症患病率显著增高，并促进癌症的脑转移。 图 3：来源 Biosensors and Bioelectronics Elena Goun 教授推测，考虑到烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）的作用是增加细胞能量、促进修复和延缓衰老，如果人体内已经出现癌细胞，对部分癌症患者补充 NAD+及其前体物质则可能有适得其反的效果，令癌细胞会长得更快、癌症转移得更为迅速。 尽管本研究只涵盖了小鼠癌症模型，补充烟酰胺核糖是否会促进
