HLEpiC说明书

公司优势：
1.具有多年的销售经验和资深的行业背景，我司秉承质量优先的理念，重视自主创新，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及性企业有着合作关系，还与国际接轨，我司代理多种知名的国际品牌，如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa，Abnova，GenWay等。
资源名称    HLEpiC说明书
种属    人晶状体上皮细胞
形态    晶状体；上皮细胞
提供形式    T25
模式菌株    未知
培养方法
生长条件    Complete growth medium: H-DMEM，90%；FBS，10%；双抗。 Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5

细胞培养的优点：
1.HLEpiC说明书研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
Anti-ATG7  自噬相关蛋白7抗体    用于厌氧菌的分离培养(Acumedia 方法)    SCHAEDLER AGAR    SCHAEDLER 琼脂
Anti-ATF4/CREB-2  活化转录因子4抗体    用于厌氧菌的分离培养(Acumedia 方法)    WILKINS-CHALGREN AGAR    WILKINS-CHALGREN琼脂
Anti-ATM  毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体    用于产气荚膜梭菌的计数和培养(Acumedia 方法)    MCP Agar    MCP琼脂
Anti-ATP2c1  钙离子ATP酶通道蛋白抗体    用于厌氧菌分离培养    Anaerobic Agar    厌氧菌琼脂
Anti-phospho-ATM(Ser1981)  磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体    用于厌氧菌分离培养(Acumedia 方法)    CDC Anaerobic Agar    CDC厌氧菌琼脂
Anti-ATF6  活化转录因子6抗体    用于溶血性链球菌的增菌培养（GB标准）    Dextrose Meat Infusion Broth    葡萄糖肉浸液肉汤    
Anti-ATP4B  氢钾ATP酶通道蛋白抗体    用于溶血性链球菌的增菌培养 （GB标准）    Pick’s Broth BaseA    匹克     匹克氏肉汤基础A  
Anti-ATP5J  ATP5J抗体    用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养（GB标准）    Meat Infusion Broth    肉浸液肉汤培养基  
Anti-ATP7A  铜转运蛋白质α链抗体    用于链球菌的增菌培养    Azide Dextrose Broth    叠氮钠葡萄糖肉汤  
Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit     大鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒     规格：    96T/48T
Rat Total bile acide,TBA ELISA Kit    大鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒     规格：    96T/48T
Rat transferrin receptor,TFR ELISA Kit    大鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat transforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit    大鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit     大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒     规格：    96T/48T
Rat transforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA Kit    大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat transforming growth factorsβ2,TGFβ2 ELISA Kit     大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISA Kit    大鼠髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat Triglyceride,TG ELISA Kit    大鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit     大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA Kit    大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat Troponin T,Tn-T ELISA Kit    大鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
HLEpiC说明书Rat trypsin ELISA Kit    大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒     规格：    96T/48T
Rat trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit    大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA Kit    大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA Kit    大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
Rat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit    大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒     规格：    96T/48T
Rat Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA Kit    大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒    规格：    96T/48T
收到HLEpiC说明书如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。