- ¥680 - 2680
- 沪震生物/HZbscience
- HZ15-100
- 进口/国产
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
TOP10F` 感受态细胞
- 保质期：
-80℃（6个月）
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 保存条件：
-80℃（6个月）
- 规格：
10*100ul/20*100ul
TOP10F` 感受态细胞
| 编号 |
名称 |
规格 |
单位 |
| HZ15-100S | TOP10F` 感受态细胞 |
10*100ul |
盒 |
| HZ15-100 |
TOP10F` 感受态细胞 |
20*100ul |
盒 |
TOP10F` 感受态细胞
TOP10F` Chemically Competent Cell 说明书
产品规格
TOP10F`： 10×100μl
pUC19（control vector）：10pg/μl 10μl
保存条件：-80℃
TOP10F` 感受态细胞
基因型
F´{lacIq Tn10 (TetR)} mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1
araD139 ∆(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
TOP10F` 感受态细胞
产品说明
TOP10F`菌株来源于TOP10菌株。将F`{lacIq Tn10 (TetR)}因子转入TOP10菌株，即为TOP10F`。该F`因子携带lacIq 抑制子，可抑制trc，tac，lac等启动子下游基因的表达，从而可以用于一些表达毒性蛋白质粒的扩繁。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。可用于构建克隆，蓝白斑筛选（如用于蓝白斑筛选，需在培养基中加入IPTG诱导β-半乳糖苷酶基因的表达）实验，具有四环素抗性。High5TM系列TOP10F`感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>107cfu/μg。
TOP10F` 感受态细胞
操作方法
1. TOP10F`感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰中静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应
抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱12-16h，时间过长会产生假阳性小菌落。
注意事项
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时 间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
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文献和实验The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
xiaomage124 请问丁香园里的战友们，谁做过点突变？TOP10F'是不是甲基化菌株？恳请指教，多谢啦！:)有请好人帮我分析下TOP10F'菌株是否有甲基化功能，因为我要做点突变，如果这个菌株具有甲基化外源质粒DNA的功能就可以了，以下是此菌株对应的基因型，多谢啦！:) F'{lac Iq Tn10(TetR)} mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 △lacⅩ74 recA1 araΔ139Δ(ara
1.5ml缓冲液B，彻底混匀； 30℃水浴孵育1h； 室温下2000g离心10min，去除上清液，菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中； 离心样品，去除上清液，轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中； 将所有转化液铺于选择性平板，于30℃孵育3～4天后，鉴定； 3、毕氏酵母电转化法 （1）E.coli TOP10F’感受态细胞的制备 取10ul TOP10F’菌液，接种于200ml LB液体培养基中活化培养，37℃，200 rpm，16～18小时。取100ul菌液接种于200ml液体LB
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