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固定化木瓜蛋白酶(琼脂糖树脂)
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4°C
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5 mL
固定化木瓜蛋白酶(琼脂糖树脂)
货号: 20341
Thermo Scientific Pierce 固定化木瓜蛋白酶由半胱氨酸-肽链内切酶(木瓜蛋白酶)组成,该酶固定在微珠状琼脂糖树脂上,用于从抗体中生成和纯化 Fab 片段。
木瓜蛋白酶是一种从木瓜蛋白酶乳胶中分离的非特异性半胱氨酸肽链内切酶,可用于广泛的应用。当在存在半胱氨酸的情况下将 IgG 分子与木瓜蛋白酶共孵育时,铰链区中的一个或多个肽键分裂,产生三个小片段:两个 Fab 片段和一个 Fc 片段。Fc 片段可通过固定化蛋白 A 或离子交换色谱与 Fab 片段分离。
50 千道尔顿 Fc 片段通常用于确定 Fc 受体的特异性,而不受抗原结合干扰。Fab 片段在免疫组织化学研究中非常有用,因为片段组织穿透的能力强于比完整 IgG。此外,仅使用免疫球蛋白的 Fab 部分,避免了 Fc 受体的非特异性结合。
木瓜蛋白酶也可用于生成 F(ab')2 片段。为了制备 F(ab')2 片段,首先用 10 mM 半胱氨酸活化木瓜蛋白酶,然后通过凝胶过滤去除。如果木瓜蛋白酶酶切过程中不存在半胱氨酸,则可以生成 F(ab')2 片段。这些片段通常不一致,并且可能存在重现性问题。
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文献和实验时,让酶液和乳化液及缓冲液混合均匀,就不摇了。”你比较过摇与不摇是否有差别吗?我觉得如果不摇的话酶与乳化液接触不充分会不会测出的酶活会偏低呢?因为我看的一般都是在固定温度下200rpm左右的转速进行反应。请指教。问:我只是觉得一定的水分对脂肪酶的结构或者活性的维持是必须的,所以想固定到树脂上也不能太干吧。具体的我不太清楚,你再找找文献吧。不能重新固定吗?你的脂肪酶是买的还是自己做的啊?我的研究课题是脂肪酶相关的,目前没做到固定化,以后可能会用到,以后大家可以相互切磋。答:我在做固定化,树脂用酒精处理
进入了微生物细胞固定化的研究历程。 固定化酶和固定化细胞的原理是将酶或微生物细胞利用物理、化学方法,将酶或细胞与固体的水不溶性支持物(或称载体)相结合,使其既不溶于水,又能保持酶和微生物的活性。它们在固相状态下既可作用于底物,又具有与离子交换树脂相似的特点,而且还具有一定的机械强度,便于操作。由于酶和微生物细胞被固定在载体上,因而它们在反应结束后,还能够反复使用,并在贮存较长时间后依然保持酶和微生物的活性不变。因此该技术在近代微生物发酵工业上的应用和发展,大大提高了酶促反应效率,并能够进行自动
酶的固定化方法不下百种,归纳起来大致可以分为三类,即载体结合法、交联法和包埋法。 (一)载体结合法 载体结合法是指将酶固定到非水溶性载体上的方法。根据固定方式的不同,这种方法又可以分为物理吸附法、离子结合法和共价结合法。物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂表面的方法,固体吸附剂多为活性炭和多孔玻璃等。离子结合法是指通过离子键将酶结合到具有离子交换基团的非水溶性载体上的方法,载体有离子交换树脂等。共价结合法是指酶和载体以共价键的形式结合在一起的方法,这种方法需要酶和载体都具有氨
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