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        脂肪酶固定化

        互联网

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        问:我将脂肪酶固定在大孔吸附树脂D3520并干燥后,想测脂肪酶的酶活。可是树脂干燥后,再放入脂肪酶的反应体系后,树脂颗粒都漂在上面而不混合。请问这种情况下该如何测酶活?(氢氧化钠滴定法测酶活)

        另外,即使我测酶活完毕,该怎样将树脂回收呢?直接将反应液过滤,酒精洗涤?请各位战友指教,谢谢!!

        答:我没有做过固定化,是不是你把大孔树脂干燥的过头了呢?你如何控制的条件啊?你可以用三丁酸甘油酯的平板粗略看一下你的固定化酶是否还有酶活啊?反应前可否直接用缓冲液浸润呢?

        另外想请教你一个问题,你说:“以前我反应时,让酶液和乳化液及缓冲液混合均匀,就不摇了。”你比较过摇与不摇是否有差别吗?我觉得如果不摇的话酶与乳化液接触不充分会不会测出的酶活会偏低呢?因为我看的一般都是在固定温度下200rpm左右的转速进行反应。请指教。

        问:我只是觉得一定的水分对脂肪酶的结构或者活性的维持是必须的,所以想固定到树脂上也不能太干吧。具体的我不太清楚,你再找找文献吧。不能重新固定吗?你的脂肪酶是买的还是自己做的啊?我的研究课题是脂肪酶相关的,目前没做到固定化,以后可能会用到,以后大家可以相互切磋。

        答:我在做固定化,树脂用酒精处理,在用水洗干净就不会漂在水上了。

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