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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Rhesus ADAM8(CD156) Gene Lentiviral ORF cDNA expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:ADAM8
反应种属:Rhesus
应用说明:
cDNA描述:Full length Clone DNA of Macaca mulatta (Rhesus monkey) ADAM metallopeptidase domain 8.
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文献和实验依赖于其完整序列和定位,cDNA 过表达常常无法重现其天然功能。 5. 需要做 rescue 实验、回补被敲除的基因 用过表达质粒(且要对 cDNA 做同义突变以抵抗原有的 gRNA)。CRISPRa 无法用于已敲除基因的回补——基因组位点已经被破坏了。 --- 四、吉凯基因CRISPR相关产品与服务 CRISPR/Cas9慢病毒产品 提供 sgRNA 与 Cas9 慢病毒包装。CRISPRa 项目中,dCas9 融合蛋白与 modified sgRNA 通常需要慢病毒稳定递送,病毒滴度和表达稳定
作为细胞生物学专业的博士生,在基因功能研究上已经有五年的经验了,今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计,慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点,为了避免移码突变,上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel,下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法,首先设计引物将目的基因 PCR 出来,即酶切位点加基因引物,此时应注意,为了防止酶切将基因破坏,通常习惯在两端
以六孔板中的1孔为例,每个样品需要1×106个293T细胞。 1、取1.5ml灭菌EP管,加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血清培养基。轻柔混匀,室温孵育5min。 2、取1.5ml灭菌EP管,取9μl 脂质体2000l溶于250μl无血清培养基中。轻柔混匀,室温孵育5min。 3、将DNA溶液和脂质体溶液轻柔混匀。室温孵育20min 4、用胰酶消化并记数293T细胞。用含血清的培养基重悬细胞。 5、在六孔板中每孔
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