- ￥1950
- Sino Biological
- 北京
- VG40203-ACG
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Influenza B Neuraminidase / NA Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：NA
反应种属：Influenza B
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Influenza B (B/Brisbane/60/2008) NA with C terminal GFPSpark tag.
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文献和实验，以便下一步试验的更好进行。3、溶液Ⅲ：pH4.8乙酸钾溶液（60ml 5mol/L KAc，11.5ml冰醋酸，28.5mlH2O）；该溶液钾离子浓度为3mol/L，醋酸根离子浓度为5mol/L.pH4.8的乙酸钾溶液是为了把抽提液的pH调至中性，从而使变性的质粒DNA复性，且稳定存在。溶液III加入后的沉淀实际上是K+置换了SDS中的Na+形成了不溶性的PDS，而高浓度的盐有利于变性的大分子染色体DNA、RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚，使得沉淀更完全。前者是因为中和核酸上的电荷，减少相斥力而互相
是什么？ 筛选任何稳定表达的基因，都有可能遇到类似的问题，因为荧光检测特别敏感、方便，所以这类问题更容易被观察到。出现这类问题，可能的原因是： 1） 挑选的单克隆不纯，混有其他细胞； 2） 即使是单克隆来源的细胞群，荧光的表达也可能不同。选择压力、细胞的生长丰度的改变都可能引起荧光表达不同。 3、挑选了稳定表达GFP的克隆，培养后，发现荧光变弱或是不稳定，该怎么办？ 1） 瞬时转染时，质粒进入细胞后以游离的形式存在。目的基因的表达是通过细胞的转录与翻译机制进行的。一个细胞可能‘吞入’数个
，质粒进入细胞后以游离的形式存在。目的基因的表达是通过细胞的转录与翻译机制进行的。一个细胞可能‘吞入’数个质粒，因此细胞间会存在差异。总的来说，稳定转染的细胞只含有1-2个被整合的质粒。因此，稳定转染细胞的荧光表达量会低于瞬时转染的细胞； 2） 确定细胞转染48小时后或是新霉素筛选前才长满。因为生长接触抑制会降低目的基因的表达； 3）确定细胞在转染后48小时以及药物筛选过程中生长状态良好。如果在瞬时表达阶段细胞不健康，可能是提示有潜在的毒性； 4）做G418杀伤曲线。如果筛
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