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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Influenza A H5N3 Hemagglutinin Gene ORF cDNA clone expression plasmid, N-His tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:HA
反应种属:H5N3
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Influenza A H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/07) HA with N terminal His tag.
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文献和实验对照,有很多层意思。最基本的意思是,要设立空载体对照。在真核系统表达的蛋白,常常量特别低。因此你不要老是想着WB和SDS-PAGE去检测。这时候,你必须多看文献,另辟蹊径,从文献中找找看这个蛋白有米有很特别的性质----比如说如果它具有酶活性,那简直就是便宜你了。还比如说,某些蛋白具有异样性质,比如说流感病毒的HA,你拿表达的不同梯度稀释的蛋白做个血凝。如果发生血凝,并且呈现一定的梯度关系,那简直就是板上钉钉的事情了。 总结起来,套用一句很经典的电影台词:能表达出来的蛋白,其原因都是一致
酶解再向β折叠链的构象转变成无活力的裂解型(cleaved-form, C型)[11]. L型抑制剂可以通过变性和复性方法转变成A型, 然后又慢慢变成L型. 流感病毒血细胞凝集素(influenza hemagglutinin, HA)在pH诱导下的结构变化与细胞膜融合功能紧密相关的. HA在pH 7.0时, 其空间结构是由helix-loop-helix的头状单体结构域组成的三聚体蛋白(HA-N); 可在低pH(pH<5)条件下, 中间Loop区域转化为螺旋结构并与另两段螺旋连接共同形成一股长螺旋
。当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。使用His-tag有下面优点:1.标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解
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