- ￥2070
- Sino Biological
- 北京
- VG40365-ANG
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Influenza A H9N2 polymerase PA Gene ORF cDNA clone expression plasmid, N-GFPSpark tag
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：PA
反应种属：H9N2
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Influenza A H9N2 (A/brambling/Beijing/16/2012) polymerase PA with N terminal GFPSpark tag.
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文献和实验要在大肠杆菌中表达蛋白呢？如果已经做过密码子优化，也是要在大肠杆菌中表达，并且确定该蛋白不会对细胞有毒性，那我们可以尝试在 N 端加标签，或者更换启动子、菌株。然后也可以对大肠杆菌的培养条件以及诱导条件的参数（如温度、时间）进行优化。如果是毒性蛋白，则建议尝试获得包涵体的条件。如果使用真核细胞表达蛋白，由于表达体系比较复杂，需要结合具体的表达系统具体分析。也可以跟义翘神州的技术支持人员进行详细的沟通。4. 用 293F 表达时常遇到蛋白无法分泌，有好的尝试方法吗？信号肽、培养基、培养添加物?解答
(1) 酵母人工染色体克隆体系(YAC) 这种克隆体系是20 世纪80 年代末发展起来的，并于1990 年底渐趋完善的大片段外源DNA 克隆体系。插入YAC 载体的外源DNA 片段可达200 l 000kb 甚至更多，并能稳定复制。现在YAC 已成为构建复杂基因组的有力手段。 (2) 黏粒克隆，n 噬菌体和细菌人工染色体 黏粒克隆的出现早于YAC ，其主要特点是插入的外源片段比入噬菌体DNA 大得多。因此在筛选基因文库时可以减少一半工作量。P1 噬菌体的溶源状态奇特，不整合到宿主的染色
expression，SAGE） SAGE其原理是以mRNA为模板，用生物素标记的Oligo（dT）为引物合成双链cDNA，以限制酶进行酶切，捕获cDNA 3′端；产物被分为两部分，分别与包含有标签内切酶位点的A、B连接子相接。经过酶切，就有可能得到只有9~10bp的标签序列。每两个标签的钝端结合后成为PCR的模板，以基于A、B连接子的引物进行PCR反应的结果是得到了大量每条包含两个不同来源标签的序列，接下来再用限制酶酶切、连接，就能将多个不同的标签链接在一起，克隆至质粒载体中后集中测序。SAGE可以检测不同
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