- ￥1770
- Sino Biological
- 北京
- VG40249-CF
- 2025年08月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
HIV-1 nef Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-Flag tag
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：HIV-nef
反应种属：HIV
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of HIV-1 (group M, subtype B, strain HXB2) nef with C terminal Flag tag.
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文献和实验后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；3.His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；4.His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体；5.可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；6.可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。 Flag:Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。FLAG作为标签
想构建稳定细胞株（稳转株），很多人搜到的第一个问题就是： 稳定细胞株构建到底有哪几种方法？慢病毒、转座子、CRISPR、质粒筛选，我该用哪个？ 先说结论： 目前最常用、适用面最广的是慢病毒介导的稳转株构建，尤其是"慢病毒感染 + 抗生素筛选"这一条路线。其他方法各有特定优势，但多数场景下慢病毒方案更值得优先考虑。 判断顺序建议是： 细胞类型 → 目的（过表达/敲低/敲除/敲入） → 是否需要单克隆 → 选择方法 快速记忆版： 普通细胞、难转染细胞过表达/敲低：慢病毒 需要精确点突变、标签
要保护好自己，需要生物安全柜（往里吹风最好），或者超净台（把风给关了 （*^__^*））。（下图是慢病毒构建载体示意图）病毒来了，需要分装，-80 保存，反复冻融影响病毒活性，一般情况系，我是将病毒分成 10 ul 一管。其次是看清你自己的病毒情况，是荧光标记（一般 GFP），还是非荧光标记 （一般标签蛋白是过表达是 Flag，敲降是 scramble）。元元做的是肿瘤相关实验，所以咱们这里讲的是贴壁的肿瘤细胞的稳转，一定注意，元元讲的是普适的方法，一定要看厂家的说明书。一般先用带有 GFP 荧
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