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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
HIV-1 gag Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-Flag tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:HIV-gag
反应种属:HIV
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of HIV-1 (group N, strain 06CM-U14296) gag with C terminal Flag tag.
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文献和实验),从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。MBP:MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。纯化:融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化。结合的融合蛋白可用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。结合
一,酵母表达系统毕赤酵母表达系统(invitrogen公司):分泌型质粒pPIC9K,宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha (甲醇诱导)宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二,原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签(N端):PET5-(a)氨苄抗性带His标签(N端):PET28-(a)卡那抗性带His标签(C端):PET24-(b)卡那抗性带His标签(C端):PET21-(a)氨苄抗性带His标签(N端)+TrxA(硫氧还蛋白):PET-32
要保护好自己,需要生物安全柜(往里吹风最好),或者超净台(把风给关了 (*^__^*))。(下图是慢病毒构建载体示意图)病毒来了,需要分装,-80 保存,反复冻融影响病毒活性,一般情况系,我是将病毒分成 10 ul 一管。其次是看清你自己的病毒情况,是荧光标记(一般 GFP),还是非荧光标记 (一般标签蛋白是过表达是 Flag,敲降是 scramble)。元元做的是肿瘤相关实验,所以咱们这里讲的是贴壁的肿瘤细胞的稳转,一定注意,元元讲的是普适的方法,一定要看厂家的说明书。一般先用带有 GFP 荧
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