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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
HIV-1 rev Gene ORF cDNA clone expression plasmid, N-Flag tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:HIV-rev
反应种属:HIV
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of HIV-1 (group M, subtype B, strain HXB2) rev with N terminal Flag tag.
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文献和实验蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点:1.FLAG作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。2.融合FLAG的目的蛋白,可以直接通过FLAG进行亲和层析,此层析为非变性纯化,可以纯化有活性的融合蛋白,并且纯化效率高。3.FLAG作为标签蛋白,其可以被抗FLAG的抗体识别,这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。4.融合在N端的FLAG,其可以被肠激酶切除(DDDK
要保护好自己,需要生物安全柜(往里吹风最好),或者超净台(把风给关了 (*^__^*))。(下图是慢病毒构建载体示意图)病毒来了,需要分装,-80 保存,反复冻融影响病毒活性,一般情况系,我是将病毒分成 10 ul 一管。其次是看清你自己的病毒情况,是荧光标记(一般 GFP),还是非荧光标记 (一般标签蛋白是过表达是 Flag,敲降是 scramble)。元元做的是肿瘤相关实验,所以咱们这里讲的是贴壁的肿瘤细胞的稳转,一定注意,元元讲的是普适的方法,一定要看厂家的说明书。一般先用带有 GFP 荧
会怎样"用 CRISPRa。 --- 一、机制差异决定了两者能回答的问题不同 过表达质粒(cDNA / ORF) 外源启动子(CMV、EF1α 等)驱动,表达量与内源调控完全脱钩; 通常只包含单一 CDS,不含内含子和 UTR; 表达量可达到内源的几十到几百倍; 可携带标签(FLAG、HA、GFP)方便检测。 CRISPRa(dCas9-VP64 / VPR / SAM / SunTag) 失活 Cas9(dCas9)融合转录激活域,被 gRNA 引导至靶基因启动子区; 激活的是内源位点,转录本包含完整的内含
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