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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Hendra virus Fusion glycoprotein Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:HeV-F
反应种属:HeV
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Hendra virus (HeV) Fusion glycoprotein DNA.
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文献和实验了。一般情况下我们要检查外源片断是否插到载体里面,检查是否引入了E.Coli不常用的密码子……而每个步骤的验证都要耗费宝贵的时间。 有没有办法提高表达的成功率呢?一般来说表达前的设计是非常重要的,比如预先对克隆片断的GC含量,密码子,mRNA二级结构等进行预测。网上的预测软件很多,但是究竟哪种优化策略或软件是最有效的呢?通常来说,DNA序列优化策略无外乎三种,一种是一个密码子一个密码子进行优化,但是这种策略通常会忽略mRNA二级结构影响。第二种策略是把所有的密码子一起进行优化,虽然听上去很全面,但是这种
化、翻译终止效率和真核细胞中异源蛋白表达的问题加以说明。 密码子最佳化(codon optimization) 遗传密码有64种,但是绝大多数生物倾向于利用这些密码子中的一部分。那些被最频繁利用的称为最佳密码子(optimal codons),那些不被经常利用的称为稀有或利用率低的密码子(rare or low-usage codons)。实际上用做蛋白表达或生产的每种生物(包括大肠杆菌,酵母,哺乳动物细胞,Pichia,植物细胞和昆虫细胞)都表现出某种程度的密码子利用的差异
。而且,在Dictyostelium中,同低水平表达的基因比较,高表达基因有较大数目的偏爱密码子。在大肠杆菌中表达哺乳动物基因是不可预测和具有挑战的。例如直到最近才实现了人血红蛋白的过表达。为了达到血红蛋白的好的表达水平,Alpha-球蛋白cDNA不得不用大肠杆菌偏爱的密码子进行重新合成。在异源宿主中实现象血红蛋白这样复杂的蛋白质的过表达可能需要最佳化密码子,这些研究者为此提供了令人信服的资料。成簇的低利用率的密码子抑制了核糖体的运动,这是基因不能以合适水平表达的一个明显机制。核糖体翻译由九个密码子组成的信使(含几个低利用率密码子
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