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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Dromedary camel coronavirus (DcCoV) Spike protein Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:DcCoV-Spike
反应种属:DcCoV
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Dromedary camel coronavirus (DcCoV) (strain HKU23-368F) Spike protein (S) with C terminal GFPSpark tag.
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文献和实验纯化和检测标签蛋白的表达。 图1 Gateway技术的灵活性 目的基因克隆进入门载体后,可以同时转移目的基因到多个目的载体。 Gateway利用了位点特异重组,所以在构建入门载体后,不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆,就可以多次使用它,转移您的目的基因到Gateway改造过的各种表达载体(目的载体)。 此外,由于在重组时DNA片段的阅读框和方向保持不变,因而您不必再为新的表达克隆测序担心。在使用每一种新的表达系统时,将会节省您更多的时间。 二、一项
的温度。在18°C,选择优化的蛋白质表达条件,这可能会增加表达蛋白质的溶解度。故障排除尝试较低的生长温度和较低的诱导剂浓度可以避免包涵体的形成,并有助于一些不正确的二硫键形成和疏水蛋白的情况。为了保护蛋白质,我们可以在培养后向培养基中加入蛋白酶抑制剂,并在冰上破碎细胞以避免降解。在大肠杆菌裂解物中在天然条件下的蛋白质纯化Trx•Tag™是移植到重组蛋白上的肽序列,可以通过肠激酶去除。这种蛋白质标签是一种增稠标签,可以帮助蛋白质正确折叠并防止它们沉淀。由重组pET-32α(+)载体表达的融合蛋白也含有
交互扣除(reciprocal subtraction):首先是要获得两个具有差别基因表达的细胞系的cDNA文库,然后将这两个文库进行交互扣除杂交,从而获得两个扣除cDNA文库。随后通过体内剪切得到质粒cDNA文库; ②差异显示(differential display):由交互扣除cDNA文库获得的纯化质粒可直接进行差异显示,这包括PCR扩增(加入3种3′锚定引物和18种5′随机引物)和进行5%序列胶电泳并切割回收差异显示条带; ③表达分析(expression analysis):运用
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