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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Rat SLC35A4 Gene Lentiviral ORF cDNA expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:SLC35A4
反应种属:Rat
应用说明:
cDNA描述:Full length Clone DNA of Rattus norvegicus solute carrier family 35, member A4.
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文献和实验潜在的毒害作用,比如:vpr 可引起细胞周期停滞,vif能抑制某些细胞的生长而Nef 能引起凋亡。1997年,Zufferey 等将包装质粒上的 vif 、vpr 、vpu 和nef 基因敲除,从而得到第二代慢病毒载体,而其他方面与上述第一代载体系统一致。研究发现即使全部4 个调节基因都被敲除。病毒颗粒的产量也不会受到影响。这种载体仍然具有体外感染非分裂期细胞、在体感染分化成熟大鼠神经元的能力,但是目前尚不能确定这种载体是否能转染全部种类细胞。由于敲除的调节基因与野生型HIV-1 病毒的生活
依赖于其完整序列和定位,cDNA 过表达常常无法重现其天然功能。 5. 需要做 rescue 实验、回补被敲除的基因 用过表达质粒(且要对 cDNA 做同义突变以抵抗原有的 gRNA)。CRISPRa 无法用于已敲除基因的回补——基因组位点已经被破坏了。 --- 四、吉凯基因CRISPR相关产品与服务 CRISPR/Cas9慢病毒产品 提供 sgRNA 与 Cas9 慢病毒包装。CRISPRa 项目中,dCas9 融合蛋白与 modified sgRNA 通常需要慢病毒稳定递送,病毒滴度和表达稳定
而异 本底表达越低的基因,可提升空间越大;本底已经高表达的基因,激活空间有限。此外,启动子区如果是高甲基化或关闭染色质,激活效果会明显变差。这是激活筛选的固有偏倚,分析时要意识到"激活不了"不等于"不重要"。 4. 需要关注旁效应 激活一个转录因子可能间接改变大量下游基因,因此命中的基因往往处于通路的上游。这是激活筛选的特点而非缺陷,但解释结果时要注意区分直接与间接。 --- 四、吉凯基因CRISPR相关产品与服务 CRISPR/Cas9慢病毒产品 提供 sgRNA 与 Cas9 慢病毒
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