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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human C17orf89 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:NDUFAF8
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human chromosome 17 open reading frame 89
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文献和实验重链可变区域的分枝点和3-受体剪切位点组成。供体和受体剪切位点、分枝点的序列均作了改变以匹配最适剪切位点的共有序列。在Rluc的紧上游是T7启动子序列,可在体外合成海洋腔肠荧光素酶的转录物。Rluc的下游是SV40晚期poly A 序列, 提供有效的转录终止和mRNA多腺苷酸化。载体含有原核的复制起始区和β-内酰胺酶基因,可在大肠杆菌中选择质粒的扩增。图8 用Passive Lysis Buffer 制备细胞裂解物中萤火虫和Renilla荧光素酶的稳定性。用pGL3-Control 和pRL
组文库;用细胞全部mRNA经反转录制备全套cDNA所建的文库称为cDNA文库。二、目的基因与载体的连接:(一) 载体:质粒、噬菌体、腺病毒DNA、逆转录病毒DNA、昆虫病毒DNA(二) 质粒:1 概念:染色体外能够独立复制、稳定遗传的一种环状双链DNA分子,在特定条件下可以可逆地整合到宿主染色体,随染色体复制而复制,通过细胞分裂传递到子代细胞。2 理想质粒需要具备的条件:(1) 分子量较小,3~10kb(2) 松弛型复制子(3) 带有可供选择的标记a. 抗生素抗性标记b. -半乳糖
时限短暂;瞬时表达系统的优点是简捷,实验周期短。大规模的瞬时表达技术是 近年来的一个研究热点。已有报道能放大到100 L反应器中生产重组蛋白,产量(分泌型蛋白)可达l~10 mg/L。不过该方法技术条件要求高,如质粒的纯度、转染的效率等。 稳定表达系统是指载体进入宿主细胞并经选择培养,载体DNA稳定存在于细胞内,目的蛋白的表达持久、稳定。由于需抗性选择甚至加压扩增等步骤,稳定表达相对耗时耗力。Geisse等以白血病抑制因子的制备为例,比较了几种不同稳定表达体系在产量及时间上的差异(表 3),把目的基因
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