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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human TMX3 Gene Lentiviral ORF cDNA expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:TMX3
反应种属:Human
应用说明:
cDNA描述:Full length Clone DNA of Homo sapiens thioredoxin-related transmembrane protein 3.
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文献和实验表达时长 瞬时 vs 长期 慢病毒/AAV 整合或长期表达,质粒只瞬时 细胞难度 易转染 vs 难转染 难转染细胞优先病毒送递 效果确认 QPCR/WB/测序 过表达干扰看 QPCR+WB,敲除看测序 哪些场景更适合 想快速看一个编码基因的功能,过表达加标签(FLAG/HA/MYC/EGFP)最方便,做互作、定位都好用;想做"基因缺失"的严格表型,敲除更干净,但周期长、要筛选克隆;只是想暂时压一压表达看趋势,干扰性价比高、来得快。有些基因压低后表型不明显,这时候过表达和干扰两头做
作为细胞生物学专业的博士生,在基因功能研究上已经有五年的经验了,今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计,慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点,为了避免移码突变,上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel,下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法,首先设计引物将目的基因 PCR 出来,即酶切位点加基因引物,此时应注意,为了防止酶切将基因破坏,通常习惯在两端
预实验,比如吉凯基因的 AAV彩虹装(神经、肝肾、心血管方向各自预配血清型组合,带报告基因)。 你可能还会问 慢病毒可以做动物实验吗?可以,但通常用在外源过表达片段超过 AAV 容量的情况;常规体内动物实验仍建议用 AAV。 慢病毒打小鼠滴度要多高?常规建议大于 1E8 TU/mL,注射体积按感染部位决定。 瘤内注射该用慢病毒还是 AAV?建议用慢病毒,因为肿瘤细胞分裂很快,慢病毒能整合进基因组、表达更稳定,不会被分裂快速稀释。 慢病毒注射后多久开始表达?约 3 天即可表达,腺病毒 1-2 天
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