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- 文献和实验
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-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human SIMC1 Gene ORF cDNA clone in cloning vector
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:SIMC1
反应种属:Human
应用说明:
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human SUMO interacting motifs containing 1
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文献和实验第二军医大学细胞生物学教研室;上海200433 何志颖;姚玉成(综述);胡以平(审校) 关键词:EST技术;“电子”基因克隆;生物信息学;基因 摘要: 随着人类基因组计划的顺利进行,EST技术被广泛应用于基因识别、绘制基因表达图谱、寻找新基因等研究领域。利用人类基因组研究不断产生的数据,从ESTs即cDNA的部分序列入手,通过同源筛选,获得基因部分乃至全长cDNA序列,避免或减轻了构建与筛选cDNA文库等繁锁实验室工作。本文从原理、应用及其在科学研究上产生的影响等方面对EST技术
利用计算机来协助克隆 基因,称为“电子”基因克隆 (sillcon cloning),是与定位克隆 、定位候选克隆 策略并列的方法之一,即采用生物信息学的方法延伸EST序列,以获得基因部分乃至全长的cDNA序列。EST数据库的迅速扩张,已经并将继续导致识别与克隆 新基因策略发生革命性变化。 1 EST序列的获取 利用计算机来协助克隆的第一步是必须获得感兴趣的EST,在dbEST数据库中找出EST的最有途径是寻找同源序列,标准:长度≥100bp,同源性50%以上、85%以下。可通过数个万维
全长的cDNA。PCR扩增产物在琼脂糖凝胶电泳中往往呈弥散状,需根据目的基因的预计大小,或Southern杂交结果回收PCR产物,然后克隆测序。初步得到的克隆多数为EST,要根据生物信息学分析的结果判断是否是目的基因的EST,如是,下一步可用RACE法克隆全长cDNA。2.锚定引物PCR法该法是得到全长cDNA较简便的方法。但要求提取高质量的mRNA,要尽量纯净和完整。在反转录时,在cDNA的两端分别加上一段24-27个核苷酸的接头。随后用这个接头作为引物扩增cDNA,然后克隆测序。该法的优点
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