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A549/DDP

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  • ATCC/DSMZ/中科院
  • 中国
  • A012
  • 2025年11月14日
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    • 英文名

      A549/DDP

    • 库存

      5012

    • 供应商

      蒂科生物

    • 肿瘤类型

      详询

    • 细胞类型

      贴壁细胞

    • 品系

      人源细胞

    • 组织来源

    • 相关疾病

      详询

    • 物种来源

    • 免疫类型

    • 细胞形态

      上皮细胞样

    • 是否是肿瘤细胞

      详询

    • 器官来源

    • 运输方式

      干冰

    • 年限

      永久

    • 生长状态

      正常

    • 规格

      T25

    细胞系使用说明书

    细胞名称

    A549/DDP 人肺癌细胞顺铂耐药株

    货号

    A010

    种属

    细胞来源

    ATCC/中科院/协和医院等地引进

    生长特性

    贴壁  上皮样

    培养条件

    培养基: 90% RPMI-1640 +10% FBS +2μM DDP (推荐HAKATA优等胎牛血清,货号:HN-FBS-50)

    温度:37℃     气相:95%空气,5% CO2

    传代

    1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;

    2.待细胞长至80-90%时,需要对其进行传代,推荐传代比例为1:3至1:5;

    3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心5min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。

    保存

    冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

    (备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)

    保存条件:液氮存储

    供应限制

    仅供研究之用

    常见问题及解决方案

    1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。

    2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基

    3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

     

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    • Construction and Characterization of Adenovirus Vectors

      C. Cells: A549 Cells: 293, low-passage Grow 293 and A549 cells in 150-mm dishes in a 37°C, 5% CO2 incubator and split 1:2 or 1:3 when they reach ~90% confluence. Cells: 293N3S Maintain 293N3S cells in 150-mm dishes

    • EdU-告别细胞增殖的烦扰

      、灵敏、快速、准确,适合各种细胞系的细胞增殖检测,尤其适用于各种细胞系的高通量筛选实验,如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。 图7 EdU增殖检测方法对各种细胞系均适用,简单、灵敏、快速、准确 EdU方法无需DNA变性,完全适用于各种显微成像技术,在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。 图8 A549细胞系孵育2h后的细胞增殖检测(10X, 20X, 40X

    • 色谱填充柱的应用

      种固定液,以改善柱的选择,使之满足分析上的要求。这些可能就是毛细管柱至今还不能普遍替代填充柱的主要原因。所以我们还是有必要了解一下填充柱分析的相关知识。填充柱填料为可分为气―固色谱柱填料及气―液色谱柱填料。     气-固色谱柱填料分为分子筛(5A、13X等),硅胶,三氧化二铝,碳分子(TDX-01,TDX-02等),高分子聚合物(如GDX系列,有机担体系列,Porapak系列,Chromosorb系列等)。     气-液色谱填料的固定液分为有机酸酯(DDP,DNP,Tween-60

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