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- 2025年08月16日
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- 技术资料
- 英文名：
L02(HL7702)(QSG-7701)
- 库存：
999
- 组织来源：
人
- 物种来源：
人
- 细胞形态：
贴壁
- 运输方式：
干冰
- 生长状态：
上皮细胞样
- 规格：
株
生物 Homo sapiens，人类
组织 肝/左叶
细胞类型 用SV40大T抗原转化的上皮细胞
产品格式 冻结的
形态学 上皮
特性 贴壁
应用 这些永生化的人肝细胞构成了药物毒理学研究的体外模型，并用于研究人肝细胞癌的病因和发病机理。
储藏条件 液氮
核型 二倍体附近
ATCC CRL-2706细胞显微照片
来源 细胞系购自原代正常肝细胞感染衍生自具有SV40大T抗原。通过将含有逆转录病毒载体[RF84749]产生的病毒将SV40T抗原的Bgl I-Hpa I片段加入到兼嗜性包装细胞系PA317中。
致癌性 没有
[RF84750] THLE-2和THLE-3细胞表达正常成人肝上皮细胞的表型特征。
当注射到无胸腺裸鼠中时，它们是非致瘤性的，具有近二倍体核型，并且不表达甲胎蛋白。
[RF84750] THLE-2和THLE-3细胞将苯并[a]芘，谢为其最终的致癌代谢物，其加合DNA，这表明功能性细胞色素P450途径。
[RF84750] THLE细胞也保留了其他参与化学致癌物质代谢的酶，如环氧化物水解酶，NADPH细胞色素P450还原酶，超氧化物歧化酶，过氧化氢酶，谷胱甘肽S-转移酶和谷胱甘肽过氧化物酶。
[RF84750]发现1989年5月提交给ATCC的培养物被支原体污染。通过用BM Cycline进行21天治疗来治愈子代。
在处理后6周时间后，通过Hoechst染色，PCR和标准培养试验测定细胞的支原体。所有测试均为阴性。
固化的细胞系可以ATCC CRL-2706获得。 继代培养 本方案中使用的体积为75 cm 2烧瓶; 按比例减少或增加其他大小的培养容器的解离培养基的量。
注意：使用的烧瓶应预先涂上 0.01 mg / mL纤连蛋白，0.03 mg / mL I型牛胶原蛋白和溶于BEBM培养基中的0.01 mg / mL牛血清白蛋白的混合物。 移除并丢弃培养基。
加入新鲜的0.05％胰蛋白酶-EDTA溶液（2.0-3.0毫升，用于T75烧瓶）覆盖细胞，冲洗并除去大部分胰蛋白酶溶液，留下薄涂层。
使培养物在室温（或37℃）下静置直至细胞脱离并在倒置显微镜下观察细胞直至细胞层分散（通常在5至15分钟内）。
注意：为了避免结块，在等待细胞分离时，不要通过敲击或摇动烧瓶来搅动细胞。难以分离的细胞可置于37℃以促进分散。
用0.1％大豆胰蛋白酶抑制剂中和胰蛋白酶并通过轻轻吹打吸出细胞。通过温和离心（150xg至400xg，8-12分钟）除去解离剂，并将细胞重悬于新鲜的完全生长培养基中。
将适当等份的细胞悬浮液加入新培养容器中。 在37°C孵育培养物。 建议使用0.05％胰蛋白酶-EDTA溶液（GIBCO目录号25300-054）进行解离。
用0.1％大豆胰蛋白酶抑制剂溶液中和。 亚文化比例： 1：3至1：6 中等更新：每周两到三次。
注意：有关细胞系的酶解和传代培养的更多信息，请参阅动物细胞培养中的第10章， R.Ian Freshney撰写的基本技术手册，第3版，由Alan R.Liss，NY，1994出版。
冷冻保存
冷冻培养基：补充有5％（v / v）DMSO的完全生长培养基
储存温度：液氮气相
文化条件
气氛：空气，95％; 二氧化碳（CO 2），5％ 温度： 37°C
L02(HL7702)(QSG-7701) 人正常肝细胞
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文献和实验目的：通过特异性阻断PI3K和mTOR，观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变，探讨相关的分子机制。 方法：在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上，以免疫印迹方法（Western blot）检测各细胞株中PI3K（p110α亚单位）、PTEN、pAkt（S473，T308）和p-mTOR（S2448）的表达情况；分别用 PI3K抑制剂LY294002（50μmol/ml）和mTOR抑制
实验动物、噬菌体肽库和细胞株 实验用荷瘤裸鼠购自上海实验动物中心，噬菌体12肽文库及大肠杆菌ER2738购自美国NewEnglandBiolab公司，人源肝癌细胞BEL―7402、正常肝细胞HL―7702购自中国科学院上海生物化学及细胞生物学研究所细胞库。 2．试剂 RPMI―1640培养基购自美国GIBCO公司，小牛血清购自杭州四季青公司；PEG―8000购自美国Amresco公司，兔抗M13噬菌体血清由澳大利亚CSIRO动物健康研究
NRK 肾细胞L-6TG 肌母细胞 3.仓鼠类BHK 幼仓鼠肾V79 中国仓鼠肺细胞CHL 中国仓鼠肺细胞CHO 中国仓鼠卵巢细胞R1610 中国仓鼠体细胞*CHO/dhFr- 二氢叶酸还原酶缺陷型CHO4．人类 2BS 胚肺 XJH B淋巴细胞 HLF 胚肺 L-02 肝细胞 WI-38 胚肺 Chang Liver 张氏肝 SL-7 胚肺 QSG-7701 肝细胞 H.A. 羊膜 293 Ad5DNA转化的胚肾 WISH 羊膜
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