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文献和实验细胞学堂丨养不好RAW 264.7,是因为忽略了这几点,RAW264.7分化有哪些问题要注意
养过 RAW 264.7 细胞系的小伙伴,都容易为一个问题感到苦恼:它太容易分化了!到底怎样才能养好它呢?RAW264.7 细胞培养注意事项有哪些,今天我们就给大家分享一些心得。 RAW264.7 细胞培养之基础篇 RAW264.7 细胞培养的第一步,是要对它的基础培养条件了如指掌,比如生长特性、细胞形态、所需的培养基,甚至培养环境、传代比例等等,做到知己知彼,才能百战百胜。 ▲产品详情 细胞系:RAW 264.7
我养的是RAW264.7细胞株,前面有战友都提到过这种细胞的消化传代,但是因为这种细胞最大的特点是贴壁特别强, 每次传代都很难消化下来, 刚开始使用胰酶消化,发现37度, 消化15min细胞也还是吹不起来,后来又用单纯的用细胞刮刀刮的办法,但是这样养了一段时间,发现细胞损伤非常大,贴壁性变差,生长缓慢,后来使用了现在这个方法,到现在细胞的生长状况一直很好!简述如下:1) 将培养瓶内旧的培养液弃掉, 然后用D-Hanks液洗两次,(一定要洗干净,以免影响胰酶的消化作用)2) 加入0.25%胰酶
luming10 求助,本人用RAW264.7细胞诱导破骨细胞一直失败,96孔板,2000个细胞/孔,RANKL50ng/ml,M-CSF25ng/ml,5到6天后TRAP染色一直没有看到理想的结果,各位前辈有做过这个实验的请传授经验,培养RAW264.7细胞的时候是否有些特别注意事项,如何使RAW264.7的状态达到最佳?以及关于TRAP染色有什么需要注意的,多谢 xxmchappyniu 同问,最近一个同事也要做RAW
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