Western Blotting实验技术对外服务 慢病毒腺病

shRNAs(short hairpin RNAs)在哺乳动物细胞中引发的基因沉默

结构。大部分情况下,至少一个shRNA能引发高于90%的基因沉默。然而,在进行生物学试验前,一定要进行检测(western blotting,免疫荧光或者RT-PCR)确认是shRNA引发基因沉默。对于转染效率不高的细胞系,应进行多次转染从而提高基因抑制的效率。对于单次转染，应在转染后的48-96小时内进行基因抑制效率的检测。这里，我们报道了利用FuGENE 6 转染 试剂 转染NIH/3T3细胞引发暂时基因沉默的一种简单方法。 材料和方法 试验

【资源】蛋白版精华帖分类汇总（2006-12-31更新）

脒 【凝胶电泳】 导读 首帖：2004-06-04 关于蛋白电泳问题总结 首帖：2004-03-06 论坛现有的sds-page帖子总集合（2004.3前） 首帖：2004-06-23 关于帖子总结 专业 首帖：2004-06-14 关于防止漏胶的心得体会 首帖：2005-11-08 [专题讨论] SDS-PAGE电泳求助专用帖！！ 首帖：2003-07-21 【专题讨论】我在SDS-PAGE中所犯的错误 【Western Blotting】 导读 首帖：2004-03-16

检测蛋白磷酸化的六种方法及其优缺点

化蛋白的浓度成正比。与更为传统的免疫印迹相比，磷酸化特异的ELISA技术具有一些优点。首先，利用经过校准的标准品，可轻松定量结果。其次，以三明治形式使用目的蛋白特异的两个抗体，带来了高的特异性。第三，ELISA的灵敏度更高允许使用更少量样品，检测低丰度的蛋白。最后，微孔板形式的通量比传统的Western blotting要高得多。ELISA通常带来了激酶活性的间接测定。不过，另一类ELISA技术使用固定化的捕获抗体、底物和磷酸化底物的检测方法，带来激酶活性的更直接测定。 基于细胞