慢病毒系统的相关技术服务 慢病毒腺病毒实验专家-追求品质-请

【求助】慢病毒相关问题

wj1989113 最近一直在做慢病毒载体，用的是第二代的三质粒系统，目的片段是一个肝细胞的转录因子。载体构建好之后，包装了一批病毒。然后拿慢病毒感染肝癌细胞株3B和Huh7细胞，想通过PCR和Western验证病毒的表达情况。出现了一些问题： 1、每次拿慢病毒感染肝癌细胞株，荧光都很亮，但是做PCR或者Western之后，加对照病毒GFP组的细胞和目的病毒无差异。（条带都较亮）尤其是Western，几乎没有差异。 2、感染

【求助】慢病毒转染肠癌贴壁细胞相关问题（急）

chenlimei518 请教各位老师们：本人今天上午9：00做慢病毒转染肠癌贴壁细胞（SW620、HCT116），结果今晚6：00去换液观察一下细胞，其中有几个孔细胞死了很多，仅在孔边缘存活几个，有些孔细胞比较多。请老师们帮忙指导。谢谢！具体步骤如下： 慢病毒包装：一、1D接293T细胞于6孔板中，1*10 6/孔 二、2D采用3质粒系统包装，12小时换液（1640+10%FBS） 三、36小时收病毒

慢病毒包装系统简介及应用

整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装 RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染，目的基因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，从而高水平的表达效应分子。 二、这一系统的目的，主要是为了解决以下问题： 1. 对于一些较难转染的细胞，如原代细胞、干细胞、不分化的细胞