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广州市益满生物科技有限公司
一、加藤片检测试剂(套装)试剂盒组成100次反应
1、定量板(加藤板) 100块 1包
2、刮片(刮棒) 100个 1包
3、玻璃纸 100张 1包
4、尼龙网(100目) 100张 1包
5、复合染液 1支 50ml
6、说明书 1份
器材准备(试剂盒内不含,请另行准备)
1.载玻片; 2.镊子(弯头镊子或其它大小镊子);
3.吸水纸;
4.记号笔、标签纸; 5.标本盒
6.电热恒温箱(有条件实验室)
二、加藤片检测试剂(套装)产品简介与特点;
本试剂盒专为人粪便加藤片制作设计,操作原理与操作规程按照国家标准。
三、加藤片检测试剂(套装)操作步骤:
1.做粪样前请提前至少24小时将玻璃纸浸泡在透明染液中;(非常重要)
2.每份粪样取3张载玻片进行编号(与待检粪样的编号相同)
3.打开待检粪样的包装,将尼龙网至于待检粪样上,用塑料刮片轻压尼龙网片并在其上轻刮,使细粪渣透过尼龙网片的微孔滤出至尼龙网表面;
4.将定量板放在载玻片中部,然后用刮片将网片表面的细粪渣填入定量板的中央孔内,填满全孔并抹平;
5.小心移去定量板,使粪样留在载玻片上;
6.取一张浸泡好的亲水玻璃纸,抖掉多余的浸泡液,盖在粪样上,用另外一块较厚的载玻片覆于玻璃纸上垂直均匀用力压制,使粪便均匀地展开于玻璃纸下;
7.将制作好的加藤片置于样本盒内(内垫吸水纸,加樟脑丸),并置于室温下透明过夜待检(建议隔夜放置12小时以上);如冬季室温达不到25℃时,可将加藤片置于25℃恒温箱内以加快透明,以待观察结果。
结果判读:
若结果定性,只需记录观察到的蠕虫卵种类;若结果需定量,需要分别记录所观察的蠕虫卵种类,并需要计算出每克粪便中的虫卵数(Per Gram Egg,EPG),计算公式:单张加藤片蠕虫卵的平均数×24。隔夜透明的加藤片往往不易观察到钩虫卵(钩虫卵一般在透明2小时内可以观察到)。
四、加藤片检测试剂(套装)注意事项
1.第一次使用前按说明书第一页清点核对试剂和材料是否完整。
2.试剂盒在常温下运输与保存,有效期2年以上,长期保存透明染液宜放置4℃保存。试剂盒使用前需在室温放置平衡15min。
3.为避免交叉污染,尼龙网、玻璃纸用完后不能重复使用,刮片与定量板重复利用需要按照生物安全规范处理后使用,但不建议重复使用。
4.制作加藤片建议在操作台上放置1次性桌布,可避免粪便污染台面,造成生物安全危害。
5.实验的废弃物处理严格按照有关实验室生物安全规范进行处置(加84消毒液或75%酒精溶液,或焚烧或掩埋)。
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
:(1)整张袋装,每袋装紫菜3张;(2)金属罐或玻璃瓶装,将每张紫菜切成10小片,每件装30~50片;(3)狭长小塑料袋装,每袋装0.3克的紫菜小片4~6片。作礼品的紫菜在金属罐外再套装潢讲究的纸盒,外观富丽堂皇。所有包装在密封前均按比例装入小纸袋包装的干燥剂。通常的干燥剂有3种:即硅胶、氯化钙、生石灰,其中生石灰效果较好,使用量约为4∶1。 产品特点 有特殊风味,呈绿色。
luciferase的表达来了解目的基因的表达情况。至于具体的PROTOCOL,因为不了解你的实验以及细胞情况,比较难说,而且各种luciferase检测试剂也不一样。我们实验室做的是共转染构建的一段基因启动子区的luciferase表达载体和目的质粒,从而初步研究目的基因对于该启动子的作用。具体步骤:共转染至少80%汇片的贴壁细胞,然后48H把细胞消化下来,按照luciferase检测试剂的说明书上机检测。
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