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- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
100ml
| 规格 | 零售价(元) |
| 100ml | 60 |
| 500ml | 200 |
| 英文名称 | Sodium Citrate buffer(0.1mol/L, pH4.5, sterile) |
|---|---|
| 储存条件 | RT,有效期1年 |
| 单位 | 瓶 |
柠檬酸钠缓冲液(SSC)是分子生物学上最为标准的印迹及分子杂交处理液,20*SSC用于杂交实验变性及清洗常用浓缩型缓冲液。
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文献和实验一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白,辛酸为短链脂肪酸,在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质;第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来,操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清(兔抗鸡血清)。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液:60mmol/L,pH4
;3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品,1700×g,离心 10 min。如果样品溶解得不好,再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液,重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质,重复抽提一次,将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中;4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇,12 000 rpm 离心 2 min;5. 用 70% 乙醇洗涤,晾干,沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
酸54m1加0.1mol/L柠檬酸钠46ml (6)pH5的醋酸缓冲液:0.2mol/L NaAc 70ml加0.2mol/L HAc 30ml (7)0.2%中性茚三酮溶液:0.2g茚三酮加100ml丙酮 (8)氨基酸混合液:丙氨酸、天冬氨酸、赖氨酸各10m1加0.1mol/L HCl 3m 【实验方法】 1. 树脂的处理 100ml烧杯中置约10g树脂,加25ml 12mo1/L HCl
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