乳酸菌基因组编辑

安必奇生物推出基于Red同源重组和CRISPR/Cas9的乳酸菌基因组编辑服务。成熟的乳酸菌（Lactic acid）编辑体系，助您成功实现基因敲除、基因插入和点突变。

基于Red同源重组法的乳酸菌基因组改造

乳酸菌基因敲除的传统方法是利用自身的Red系统对外源进入的DNA进行同源重组，从而实现目标基因的等位替换。通过设计靶基因的同源融合片段，将其克隆至自杀载体中，自杀载体通过接合输入到靶细菌。通过抗生素筛选细菌基因组靶位点整合有自杀载体的插入突变株。在第二轮反向选择压力下，只有乳酸菌基因组发生第二次同源重组并丢失自杀质粒才可以存活。

基于CRISPR/Cas9平台的乳酸菌基因组改造

CRISPR/Cas9系统是细菌和古细菌特有的一种天然防御系统,用于抵抗病毒或外源性质粒的侵害。安必奇生物科技推出CRISPR方法进行乳酸菌基因组改造服务（包括基因敲除、定点突变、定点插入外源序列等）。相比于传统的基因敲除方法，该方法速度快，无痕；非常便于后续的实验研究。

研究内容

• 乳酸菌基因敲除（Lactic acid bacteria gene knockout）

• 乳酸菌基因敲入（Lactic acid bacteria gene knockin）

• 乳酸菌基因点突变（Lactic acid bacteria gene point mutation）

服务优势

• 无痕编辑

• 有效准确

• 多基因编辑：能同时敲除多达3个基因

• 便于筛选：不要求靶细菌具有抗生素抗性

• 结果精确：测序鉴定

• 周期快：3周交付

• 定制服务：模式菌株或者宿主菌株

• 定制服务：开发特殊物种的基因组编辑系统

客户提供信息

• 乳酸菌宿主菌株信息

• 靶基因的ID或靶序列

下游应用

• 抗生素及重要工业用酶

• 发现新的基因功能

• 优化代谢通路，提升代谢产物产量，实现工业化生产

参考文献：

• Selle K, Barrangou R. Harnessing CRISPR–Cas systems for bacterial genome editing[J]. Trends in microbiology, 2015, 23(4): 225-232.

• Zerbini, F., Zanella, I., Fraccascia, D., König, E., Irene, C., & Frattini, L. F., et al. (2017). Large scale validation of an efficient CRISPR/Cas-based multi gene editing protocol in Escherichia coli. Microbial Cell Factories, 16(1), 68.