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JM110感受态细胞

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  • geltinsa
  • JLC-G013
  • 国内
  • 2025年07月14日
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      86

    • 英文名

      JM110 Chemically Competent Cell

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      江西江蓝纯生物试剂有限公司

    • 保存条件

      避光保存

    • 规格

      10×100ul/50×100ul

    规格:10×100ul产品价格:¥240.0
    规格:50×100ul产品价格:¥1020.0
    JM110感受态细胞

    JM110 Chemically Competent Cell

    产品货号: JLC-G013        
          
    保存条件: -80℃   

    产品规格:10×100μl  50×100μl

    产品介绍:
     
    基因型 : 
    rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIqlacZΔM15]

    简单说明 : 
    JM110菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR) ;是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株,提取得到的质粒DNA,可被对dam、dcm甲基化敏感的内切酶切割; lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选,但转化效率不高, High5TM系列JM110感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19 质粒检测转化效率约107 cfu/μg。一般不用于质粒构建,只适用于质粒转化。

    操作说明 : 
    1. JM110感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。

    2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

    3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB无菌培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

    4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

    5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

    注意事项 :
    1. 感受态细胞在冰上融化。冰上放置大约5分钟即可融化,融化后8分钟内加入质粒,否则会影响转化效率。

    2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。

    3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。
     

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      菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征

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      就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征 Xl1-Blue菌株 基因型:endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK

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