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ER2566 感受态细胞

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  • ¥360 - 1530
  • geltinsa
  • JLC-G019
  • 国内
  • 2025年07月16日
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      29

    • 英文名

      ER2566 Chemically Competent Cell

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      江西江蓝纯生物试剂有限公司

    • 保存条件

      避光保存

    • 规格

      10×100μl/50×100μl

    规格:10×100μl产品价格:¥360.0
    规格:50×100μl产品价格:¥1530.0
    ER2566 感受态细胞

    ER2566 Chemically Competent Cell

    产品货号: JLC-G019    
                         
    保存条件: -80℃   

    产品规格: 10×100μl  50×100μl

    产品介绍:
                  
    基因型 : 
    F- λ- fhuA2[lon] ompT lacZ::T7gene1 gal sulA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS) endA1 [dcm]

    简单说明 : 
    ER2566菌株是NEB公司开发的具有超高转化效率的蛋白表达原核菌株,来源于BL21。Lac启动子启动下游T7RNA聚合酶的表达,可用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达。fhuA2赋予ER2566菌株对噬菌体T1的抗性。同时ER2566为lon 和 ompT蛋白酶缺陷菌株。Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效抑制表达的异源蛋白在大肠杆菌体内的降解,Δ(mcrC-mrr)114,mcr-73突变的存在使ER2566菌株无法对外源DNA进行标记、限制,提高了外源甲基化DNA的转化效率。High5TM系列ER2566感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达109 
    cfu/μg DNA。 

    操作说明 : 
    1. 取100μl冰上融化的ER2566感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

    2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

    3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

    4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

    5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

    注意事项 :
    1. 感受态细胞在冰上融化。

    2. 混入质粒时应轻柔操作。

    3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。

    4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

    5. 为获得需要量的蛋白,佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
     

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