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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
29
- 英文名:
ER2566 Chemically Competent Cell
- 保质期:
12个月
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件:
避光保存
- 规格:
10×100μl/50×100μl
| 规格: | 10×100μl | 产品价格: | ¥360.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50×100μl | 产品价格: | ¥1530.0 |
ER2566 Chemically Competent Cell
产品货号: JLC-G019
保存条件: -80℃
产品规格: 10×100μl 50×100μl
产品介绍:
基因型 :
F- λ- fhuA2[lon] ompT lacZ::T7gene1 gal sulA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS) endA1 [dcm]
简单说明 :
ER2566菌株是NEB公司开发的具有超高转化效率的蛋白表达原核菌株,来源于BL21。Lac启动子启动下游T7RNA聚合酶的表达,可用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达。fhuA2赋予ER2566菌株对噬菌体T1的抗性。同时ER2566为lon 和 ompT蛋白酶缺陷菌株。Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效抑制表达的异源蛋白在大肠杆菌体内的降解,Δ(mcrC-mrr)114,mcr-73突变的存在使ER2566菌株无法对外源DNA进行标记、限制,提高了外源甲基化DNA的转化效率。High5TM系列ER2566感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达109
cfu/μg DNA。
操作说明 :
1. 取100μl冰上融化的ER2566感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项 :
1. 感受态细胞在冰上融化。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5. 为获得需要量的蛋白,佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
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文献和实验亦称橙果。为肉果的一种。是由多心皮合成的子房发育而成的果实。桔子、柚子( Citrus sinensis)等都属于这类果实。外果皮一般强韧,含多量胡萝卜素和油质。中果皮厚而软,具有海绵状的结构。内果皮为囊状,是薄而结实的膜状物,囊中有许多毛发育,其中充满着细胞液,柑桔类( Citrus)其可食的部分就是这部分。
The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
真核细胞内具有界膜的细胞器。与高尔基体、溶酶体、过氧化物酶体及细胞核膜等一起,统称为内膜系统。内质网由单位膜围成的形状大小不同的小管、小囊或扁囊构成。是一个连续的网状膜系统,其内腔通连,内质网膜和核外膜相连,内质网腔与核膜间腔也通连。内质网的形态变化很大,随细胞种类、生理条件而异。如鼠肝细胞和一些分泌细胞的内质网有很多平行排列的扁囊;精巢间质细胞内质网为大量小管分支形成网状。在胚胎或未分化的细胞,内质网不发达,较小,随着细胞分化过程之进展,内质网大小和形态复杂性也增加








