- ¥360 - 1530
- geltinsa
- JLC-G7026
- 国内
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
35
- 英文名：
Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell
- 保质期：
12个月
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件：
避光保存
- 规格：
10×100ul/50×100ul
| 规格： | 10×100ul | 产品价格： | ¥360.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50×100ul | 产品价格： | ¥1530.0 |
Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell
产品货号： JLC-G7026
保存条件： -80℃
产品规格：10×100μl 50×100μl
产品介绍：
基因型 :
F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm (DE3) pRARE2 (CamR)
简单说明 :
Rosetta 2(DE3)菌株来源于BL21，是BL21的衍生菌株，为Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株，这两种酶的缺失有效防止异源蛋白在大肠杆菌体内的降解。将具有氯霉素抗性的pRARE2质粒导入BL21 (DE3)细胞中即是Rosetta 2(DE3)，pRARE2质粒可补充大肠杆菌缺乏的7种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA和CGG)对应的tRNA，提高外源基因的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。Rosetta 2(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率达108 cfu/μg DNA。
操作说明 :
1. Rosetta 2(DE3)感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的质粒并用手拨打EP管底混匀，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT 或 LB)，混匀后37℃，200 rpm 复苏60 分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取50 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项 :
1. 感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8 分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
3. 诱导时，IPTG浓度可选（0.1-10 mM均可）。
4. 为获得需要量的蛋白，佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
5. Rosetta 2(DE3) 菌株携带 pRARE2质粒，除复苏培养基为无抗生素外，其余所用培养基、培养液均应含有34 µg/ml氯霉素，以防质粒丢失。
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- 内容
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文献和实验摘要： 本文主要介绍了各种感受态细胞的区别、用途和特征. Xl1-Blue菌株 基因型： endA1 gyrA96（nalR） thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ（lacZ）M15] hsdR17（rK- mK+）.
菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶，从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征
-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
