- ￥700
- mlBio/酶联生物
- mlE6023
- 国内
- 2026年01月04日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 英文名：
KRTS Rosetta2(DE3)感受态细胞
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件：
避光低温保存
- 规格：
10T
储存
RTS系列感受态为干粉形式，均可室温保存3天，长期保存-20°C（2年）。经Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受态必须分装后，并于-60°C以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融，在-60°C以下可保存6个月。
使用方法
1. 从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化，放置于冰上。
注意：该试剂含长链带电化合物，允许反复冻融20次，使用完毕后继续-20°C保存。
2. 取50 μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2 ml EP管中，加入10～100 ng质粒DNA（不可使用连接产物），枪头吹打混合均匀，冰上放置2min。
注意：放置时间不要超过30min，过长时间会导致核酸聚合，从而影响转化效价。
3. 将上述混合物（50 μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA）加入到一支RTS表达感受态细胞干粉中，枪头轻轻吹打，彻底溶解细胞干粉，置于冰上15min。
注意：使用RTS 表达感受态细胞干粉前，轻甩干粉至管底部，如果发现干粉已经溶解则不可使用。
4. 置于42°C热激1min后，迅速置于冰上急冷2min。
5. 将热激完毕的感受态细胞转移到含有450 μl不含抗生素的SOC（或LB）培养基，37°C振荡（225 rpm）培养60min。使质粒上抗性标记基因表达，菌体复苏。
6. 取200 μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
7. 将平板置于37°C培养，12~18小时后可出现菌落。
8. 获得的表达菌，可使用IPTG进行诱导表达，从而获得重组蛋白。
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文献和实验摘要： 本文主要介绍了各种感受态细胞的区别、用途和特征. Xl1-Blue菌株 基因型： endA1 gyrA96（nalR） thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ（lacZ）M15] hsdR17（rK- mK+）.
菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶，从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征
-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
