BL21 Star(DE3)感受态细胞

BL21 Star(DE3)感受态细胞

BL21 Star(DE3) Chemically Competent Cell

产品货号： JLC-G021  
                      
保存条件： -80℃   

产品规格： 10×100μl   50×100μl

产品介绍：

基因型 :
F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)

简单说明 :
BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于BL21(DE3)菌株，含有rne131基因突变体，rne131突变基因能够增强菌株细胞内mRNA的稳定性，从而提高蛋白表达能力。主要适用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达。High5TM系列BL21 Star(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。

操作说明 : 
1. 取100μl冰上融化的BL21 Star(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB
培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

注意事项 :
1.  感受态细胞在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。

4. 诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5. 为获得需要量的蛋白，佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。