- ¥240 - 1020
- geltinsa
- JLC-G007
- 国内
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
84
- 英文名：
HB101 Chemically Competent Cell
- 保质期：
12个月
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件：
避光保存
- 规格：
10×100ul/50×100ul
| 规格： | 10×100ul | 产品价格： | ¥240.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50×100ul | 产品价格： | ¥1020.0 |
HB101 Chemically Competent Cell
产品货号： JLC-G007
保存条件： -80℃
产品规格：10×100μl 50×100μl
产品介绍：
基因型 :
F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20(strR) glnV44λ-
简单说明 :
HB101菌株是 E. Coli K12菌株和 E. Coli B 菌株的杂合产物（同时也是Stbl3的原始菌株）。recA13突变可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；但不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液。hsdS20背景使HB101缺失内切酶系统，增强了外源DNA的稳定性和提取质量；此菌株具有链霉素抗性；不存在lacIqZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。High5TM系列HB101感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>5×108cfu/μg。
操作说明 :
1. HB101感受态细胞放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB无菌培养基，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项 :
1. 感受态细胞处于冰水混合状态时立即插入冰上。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。
4. 操作过程中勿将感受态暴露于氧化性环境中，例如超净台应将臭氧排净后再使用。
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文献和实验Transformation of HB-101 Competent Cells
实验步骤 1. Thaw tubes of competent cells on ice, occasionally inverting gently to mix. 2. Pre-cool Falcon 2059 tubes on ice. 3. Aliquot 30 ul cells into each tube. 4. Add up to 10 ul DNA in TE or ligation
, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.... 液氮或低温冰箱中取出的 大肠杆菌 *E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升 锥形瓶 的SOC培养基. 培养基 量不可再多,会影响效率.在18度 150
观察到。 三．实验材料 受体菌：E.coli K12 HB101 质粒：pGLO plasmid 转化液（CaCl2） 氨苄青霉素（amp） 阿拉伯糖（ara） 培养基：固体LB、液体LB 接种环、移液器等 四．实验步骤 1. 准备平板： 每组：1块LB平板，2块LB/amp平板，1块LB/amp/ara平板 2. 准备感受态细胞：用250µl无菌水或转化液悬浮试剂盒中提供的大肠杆菌菌粉，此即感受态细胞
