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- 百奥莱博
- ALH191-RPC
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
273
- 英文名：
Two Steps SYBR Green qRT-PCR Kit
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50μl×25次|50μl×50次
特别提示：包括荧光定量反转录PCR试剂盒(两步法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：荧光定量反转录PCR试剂盒(两步法)
英文名称：Two Steps SYBR Green qRT-PCR Kit
产品货号：ALH191
产品规格：50μl×25次|50μl×50次
本系统由两个试剂盒组合而成。一个是第一链cDNA高效合成试剂盒（ALH262）,一个是2×SYBR Green qPCR Mix（ALH185）。首先由反转录第一链试剂盒合成cDNA，然后以cDNA做模板用2×SYBR Green qPCR Mix进行荧光定量PCR扩增。
储存条件：-20℃。
本制品别名：RT-qPCR试剂盒|SYBR Green荧光定量反转录试剂盒|反转录荧光定量PCR试剂盒
我公司销售的荧光定量反转录PCR试剂盒(两步法)价格，SYBR Green荧光定量反转录试剂盒，反转录荧光定量PCR试剂盒，RT-qPCR试剂盒质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分？
各位老师： 您们好！偶欲做几个基因的RT-PCR实验。偶先用传统的半定量两步法RT-PCR试剂盒(TaKaRa DRR019A)扩增了几个基因，并用该试剂盒反转录了不少cDNA。但还有2个基因偶打算用real time PCR法来扩增。拟采用TaKaRa DRR041S试剂盒。但是TaKaRa DRR041S试剂盒说明书上写的反转录步骤是使用另外一个单独的RT Reagents (TaKaRa DRR033A)，得到cDNA再用TaKaRa DRR041S试剂盒扩增。但是仅一个RT
15sec，40个循环。实验结果 用小鼠肝脏组织RNA直接进行一步法荧光定量PCR；RNA经反转录成cDNA后分别用BioTeke试剂和T公司试剂同时进行两步法荧光定量PCR结果如图1。 两公司试剂同时在小鼠肝脏组织通过两步法荧光定量PCR试剂扩增和山大实验室所提供cDNA及引物扩增结果如图2。扩增的小鼠肝脏样品熔解曲线较差，而山东大学实验室所提供的cDNA和引物进行的扩增则完好。原因为由于长途携带引物和cDNA，保护措施不佳，造成引物和cDNA部分降解。 小鼠肝脏组织RNA经提取后直接
，一个样本建议至少做 3 个技术型重复；5、模板为 cDNA 时，建议稀释 5 - 10 倍，减少反转录体系对 qPCR 实验的抑制作用，模板量最好进行梯度摸索，使 CT 值落在 20 - 30 之间最佳；6、确定所需的反应数量，在反应数量的基础上增加 5 - 10%，计算体积配置数量；7、体系配制采用能预混则预混原则，混匀后离心并保证无气泡；8、尽量选择进口且配套的耗材，如 ABI 仪器最好使用 ABI 封板膜，伯乐仪器使用配套的白色陶瓷板子。反应条件的设定：不同的荧光定量酶可能反应条件不一
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