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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
57
- 英文名:
Ar 1193 电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*10
Ar 1193 电击感受态细胞50ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:Ar 1193 电击感受态细胞50ul*10
规格:50ul*10
分类:发根农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
Ar 1193 电击感受态细胞50ul*10操作说明:
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
Hepa 1-6细胞,肝癌细胞 人结直肠癌细胞,HCT116细胞 CM-H012人支气管平滑肌细胞完全培养基100mL三苯双脒(标准品)tribendimidine质量规格:UV法含量测定
大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3焦地黄苯乙醇甙B1(标准品)Jionoside B1质量规格:HPLC≥98%,标准品
CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 人细胞裂解液 (阳性对照) N-6022N6022质量规格:>98%,GSNOR抑制剂
心肌细胞培养基CMM巴柳氮钠(标准品)Balsalazide质量规格:含量测定
AGO2 Others Mouse 小鼠 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 依帕司他(标准品)Epalrestat 质量规格:UV法含量测定
RSC, 大鼠雪旺细胞 NCYC 234[IPAZSC 148]细胞 COS-7(SV40 转化的非洲绿猴肾细胞)大豆分离蛋白Soy protein isolate质量规格:蛋白含量≥90%,BR
人鼻咽癌细胞;CNE-2ZS-2-羟基戊二酸(2S)-2-Hydroxyglutaric Acid 质量规格:美国原装进口,95%
DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-去氮腺嘌呤3-Deazaneplanocin A HCl salt质量规格:美国原装进口,97%
人导管癌细胞;ZR-75-14-氧代维甲酰酚胺3-Keto Fenretinide 质量规格:美国原装进口
TP63 Others Human 人 P63 / TP63 / Tumor 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 4-表米诺环素4-Epi Minocycline质量规格:美国原装进口
脱水泽泻醇F HPLC≥95% 20mg Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
泽泻醇O HPLC≥95% 20mg Ratgalanin,GALELISA试剂盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
泽泻醇 K 醋酸酯 HPLC≥95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去乙酰泽泻醇O HPLC≥95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA试剂盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
刻叶紫堇胺 HPLC≥95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T
()二氢槲皮素 HPLC≥95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA试剂盒大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T
桑根酮K HPLC≥95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
环桑素 HPLC≥95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA试剂盒大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
,二甲氧基,','三羟基黄酮 HPLC≥95% 20mg RatGelsolinELISAKit大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小构树醇A HPLC≥95% 20mg RatGelsolinELISA试剂盒大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Ar 1193 电击感受态细胞50ul*10RatFreeThyroxine,FT4ELISA试剂盒大鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 去氧泽泻醇B HPLC≥95% 20mg
Ratgalanin,GAL大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 脱水泽泻醇F HPLC≥95% 20mg
Ratgalanin,GALELISA试剂盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 泽泻醇O HPLC≥95% 20mg
RatGamma-aminobyricacid,GABA大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 泽泻醇 K 醋酸酯 HPLC≥95% 20mg
RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA试剂盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 去乙酰泽泻醇O HPLC≥95% 20mg
RatGasoiestinalcancerMarker-CA199大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T 刻叶紫堇胺 HPLC≥95% 20mg
RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA试剂盒大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T ()二氢槲皮素 HPLC≥95% 20mg
RatGATAbindingprotein4,GATA4大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 桑根酮K HPLC≥95% 20mg
RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA试剂盒大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 环桑素 HPLC≥95% 20mg
RatGelsolin大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格:96T/48T ,二甲氧基,','三羟基黄酮 HPLC≥95% 20mg
Ar 1193 电击感受态细胞50ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:Ar 1193 电击感受态细胞50ul*10
规格:50ul*10
分类:发根农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
Ar 1193 电击感受态细胞50ul*10操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
Hepa 1-6细胞,肝癌细胞 人结直肠癌细胞,HCT116细胞 CM-H012人支气管平滑肌细胞完全培养基100mL三苯双脒(标准品)tribendimidine质量规格:UV法含量测定
大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3焦地黄苯乙醇甙B1(标准品)Jionoside B1质量规格:HPLC≥98%,标准品
CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 人细胞裂解液 (阳性对照) N-6022N6022质量规格:>98%,GSNOR抑制剂
心肌细胞培养基CMM巴柳氮钠(标准品)Balsalazide质量规格:含量测定
AGO2 Others Mouse 小鼠 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 依帕司他(标准品)Epalrestat 质量规格:UV法含量测定
RSC, 大鼠雪旺细胞 NCYC 234[IPAZSC 148]细胞 COS-7(SV40 转化的非洲绿猴肾细胞)大豆分离蛋白Soy protein isolate质量规格:蛋白含量≥90%,BR
人鼻咽癌细胞;CNE-2ZS-2-羟基戊二酸(2S)-2-Hydroxyglutaric Acid 质量规格:美国原装进口,95%
DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-去氮腺嘌呤3-Deazaneplanocin A HCl salt质量规格:美国原装进口,97%
人导管癌细胞;ZR-75-14-氧代维甲酰酚胺3-Keto Fenretinide 质量规格:美国原装进口
TP63 Others Human 人 P63 / TP63 / Tumor 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 4-表米诺环素4-Epi Minocycline质量规格:美国原装进口
脱水泽泻醇F HPLC≥95% 20mg Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
泽泻醇O HPLC≥95% 20mg Ratgalanin,GALELISA试剂盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
泽泻醇 K 醋酸酯 HPLC≥95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去乙酰泽泻醇O HPLC≥95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA试剂盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
刻叶紫堇胺 HPLC≥95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T
()二氢槲皮素 HPLC≥95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA试剂盒大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T
桑根酮K HPLC≥95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
环桑素 HPLC≥95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA试剂盒大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
,二甲氧基,','三羟基黄酮 HPLC≥95% 20mg RatGelsolinELISAKit大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小构树醇A HPLC≥95% 20mg RatGelsolinELISA试剂盒大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Ar 1193 电击感受态细胞50ul*10RatFreeThyroxine,FT4ELISA试剂盒大鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 去氧泽泻醇B HPLC≥95% 20mg
Ratgalanin,GAL大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 脱水泽泻醇F HPLC≥95% 20mg
Ratgalanin,GALELISA试剂盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 泽泻醇O HPLC≥95% 20mg
RatGamma-aminobyricacid,GABA大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 泽泻醇 K 醋酸酯 HPLC≥95% 20mg
RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA试剂盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 去乙酰泽泻醇O HPLC≥95% 20mg
RatGasoiestinalcancerMarker-CA199大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T 刻叶紫堇胺 HPLC≥95% 20mg
RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA试剂盒大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T ()二氢槲皮素 HPLC≥95% 20mg
RatGATAbindingprotein4,GATA4大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 桑根酮K HPLC≥95% 20mg
RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA试剂盒大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 环桑素 HPLC≥95% 20mg
RatGelsolin大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格:96T/48T ,二甲氧基,','三羟基黄酮 HPLC≥95% 20mg
Ar 1193 电击感受态细胞50ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
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