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K599 感受态细胞100ul*10

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  • 博湖
  • BH-G2225
  • 进口、国产
  • 2025年07月05日
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      49

    • 英文名

      K599 感受态细胞

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海博湖

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100ul*10

    产品名称:K599 感受态细胞100ul*10
    规格:100ul*10
    分类:发根农杆菌感受态细胞
    保存条件(保质期):   -806个月)

    产品细节图片1
    K599 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    K599 感受态细胞100ul*10注意事项:
    1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
    2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
    3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
    4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
    5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
    6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
    7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
    力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
    8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
    K599 感受态细胞100ul*10操作说明:
    1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
    待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
    2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
    A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
    B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
    3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
    4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
    5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
    6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。
    ANGPT2 Others Human ANG2 / Angiopoietin-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴邻苯三酚红Bromopyrogallol red质量规格:IND

    星形胶质细胞培养基ACM盐酸副品红Basic Fuchsin质量规格:BS,用于生物学染色
    CD164 Others Human CD164 / Endolyn 人细胞裂解液 (阳性对照) 灿烂黄Brilliant Yellow质量规格:IND
    GPS5 豚鼠皮肤成纤维样细胞刚果红(AR)Congo red质量规格:AR
    CM-R123大鼠角膜成纤维细胞完全培养基100mL钙羧酸指示剂(AR)Calconcarboxylic acid质量规格:AR
    人角膜成纤维细胞 (HcorF)( 5×105 ) EPC, 大鼠血管内皮祖细胞 Rattus银杏内酯B(标准品)Ginkgolide B质量规格:HPLC98%,标准品

    人低分化肺腺癌细胞;SK-LU-1VLup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[β-D-glucopyranosyl(14)[a-L-rhamnopyranosyl) (12)-a -L-arabinopyranosyl]oxy], (3β,4a)-)质量规格:HPLC98%,标准品
    CANX Others Human CANX / Calnexin 人细胞裂解液 (阳性对照) VHederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(12)-(β-D-glucopyranosyl(14))-α-L-arabinopyranoside质量规格:HPLC98%,标准品
    人结肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mLGDC0994GDC-0994质量规格:ERK1/2 抑制剂
    RAW 264.7细胞,小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 溶组织梭菌Closidium histolyticum 水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S3氨三乙酸Nitrilotriacetic acid质量规格:AR
    外消旋西他列汀  rac-Sitagliptin  质量规格:美国进口 英文名称RatHRAbIgGELISAKit大鼠抗心肌抗体IgG(HRAbIgG)规格:96T/48T

    西他列汀  Sitagliptin Phosphate  质量规格:美国进口 英文名称RatHRAbIgGELISAKit大鼠抗心肌抗体IgG(HRAbIgG)规格:96T/48T
    西他列汀N-硫酸盐  Sitagliptin N-Sulfate  质量规格:美国进口 英文名称RatHRAbIgMELISAKit大鼠抗心肌抗体IgM(HRAbIgM)规格:96T/48T
    西他列汀氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸  Sitagliptin Carbamoyl β-D-Glucuronide  质量规格:美国进口 英文名称RatHRAbIgMELISAKit大鼠抗心肌抗体IgM(HRAbIgM)规格:96T/48T
    壮观霉素盐酸盐  Spectinomycin hydrochloride  质量规格:美国进口 英文名称RatIerferonαELISAKit大鼠干扰素α(IFNα)ELISAKit规格:96T/48T
    硫酸壮观霉素四水化合物  Spectinomycin sulfate tetrahydrate  质量规格:美国进口 英文名称RatIerferonαELISAKit大鼠干扰素α(IFNα)ELISAKit规格:96T/48T
    坦索罗辛  tamsulosin  质量规格:美国进口 英文名称RatinducibleniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠诱导型合成酶(iNOS)规格:96T/48T
    (S)-坦索罗辛盐酸盐  (S)-Tamsulosin Hydrochloride  质量规格:美国进口 英文名称RatinducibleniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠诱导型合成酶(iNOS)规格:96T/48T
    替米沙坦-d3  Telmisartan-d3  质量规格:美国进口 英文名称RatInhibinAELISAKit大鼠抑制素A(INHA)规格:96T/48T
    替米沙坦酰基-β-D-葡萄糖苷酸-d3  Telmisartan-d3 Acyl-β-D-glucuronide  质量规格:美国进口 英文名称RatInhibinAELISAKit大鼠抑制素A(INHA)规格:96T/48T
    K599 感受态细胞100ul*10英文名称RatHLA-1大鼠组织相容性抗原(HLA-1)规格:96T/48T 罗舒伐他汀内酯  Rosuvastatin Lactone  质量规格:美国进口

    英文名称RatHLA-2大鼠组织相容性抗原(HLA-2)规格:96T/48T (3R,5R)-罗舒伐他汀  (3R,5R)-Rosuvastatin  质量规格:美国进口
    英文名称RatHLA-2大鼠组织相容性抗原(HLA-2)规格:96T/48T 罗舒伐他汀酰基-β-D-葡萄糖苷酸  Rosuvastatin Acyl-β-D-glucuronide  质量规格:美国进口
    英文名称RatHRAbIgG大鼠抗心肌抗体IgG(HRAbIgG)规格:96T/48T 外消旋西他列汀  rac-Sitagliptin  质量规格:美国进口
    英文名称RatHRAbIgG大鼠抗心肌抗体IgG(HRAbIgG)规格:96T/48T 西他列汀  Sitagliptin Phosphate  质量规格:美国进口
    英文名称RatHRAbIgM大鼠抗心肌抗体IgM(HRAbIgM)规格:96T/48T 西他列汀N-硫酸盐  Sitagliptin N-Sulfate  质量规格:美国进口
    英文名称RatHRAbIgM大鼠抗心肌抗体IgM(HRAbIgM)规格:96T/48T 西他列汀氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸  Sitagliptin Carbamoyl β-D-Glucuronide  质量规格:美国进口
    英文名称RatIerferonα大鼠干扰素α(IFNα)规格:96T/48T 壮观霉素盐酸盐  Spectinomycin hydrochloride  质量规格:美国进口
    英文名称RatIerferonα大鼠干扰素α(IFNα)规格:96T/48T 硫酸壮观霉素四水化合物  Spectinomycin sulfate tetrahydrate  质量规格:美国进口
    英文名称Ratinducibleniicoxidesyhase大鼠诱导型合成酶(iNOS)规格:96T/48T 坦索罗辛  tamsulosin  质量规格:美国进口
     

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