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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
GV3101(pJlC SA-rep)感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*10
GV3101(pJlC SA-rep)感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
GV3101(pJlC SA-rep)感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
HFL-I细胞,人胚肺成纤维细胞 鼠肌原细胞,C2C12细胞 T-105BIII型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL盐酸氟西汀(标准品)Fluoxetine Hydrochloride质量规格:HPLC>98%,标准品
SK-N-SH(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2马来酸氟伏沙明Fluvoxamine maleate质量规格:>98.5%,BP2007
HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells 肺成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)马来酸氟伏沙明(标准品)Fluvoxamine maleate质量规格:HPLC>98%,标准品
原代表皮角化细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml福美斯坦Formestane质量规格:>99%
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 福美斯坦(标准品)Formestane质量规格:HPLC≥98.0%,标准品
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1 胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解缓冲液) 1mL甘罗溴铵(标准品)Glycopyrrolate质量规格:含量测定
MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人癌细胞 Human安倍生坦Ambrisentan质量规格:>98%
CHST15 Others Human 人 CHST15 / BRAG 人细胞裂解液 (阳性对照) 安倍生坦(标准品)Ambrisentan质量规格:>98%,标准品
人肺鳞癌细胞;NCI-H520盐酸决奈达隆Dronedarone HCL质量规格:>99%,盐酸盐
GPR56 Others Human 人 GPR56 / TM7LN4 人细胞裂解液 (阳性对照) 决奈达隆(标准品)Dronedarone质量规格:HPLC>98%,标准品
新橙皮苷二氢查尔酮 HPLC≥98% 20mg HumanSerumamyloidP,SAPELISAKit 人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
新穿心莲内酯 HPLC≥98% 20mg HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
新对叶百部碱 HPLC≥98% 20mg HumanSialicacid,SAELISAKit 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
新苦味素 HPLC≥98% 20mg Humansolubleansferrieceptor,sTfRELISAKit人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新鲁斯可皂苷元 HPLC≥98% 20mg Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新绿原酸 HPLC≥98% 20mg HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新芒果苷 HPLC≥98% 20mg HumanSomatostatin,SSELISAKit人生长抑素(SS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新藤黄酸 HPLC≥98% 20mg HumanSomelysin-1,ST1ELISAKit人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新西兰牡荆苷 HPLC≥98% 10mg HumanSomelysin-3,ST3ELISAKit人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新知母皂苷BII HPLC≥98% 20mg Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 人山梨醇脱轻酶(SDH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
GV3101(pJlC SA-rep)感受态细胞100ul*10HumanSerumamyloidP,SAP 人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新橙皮苷二氢查尔酮 HPLC≥98% 20mg
HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新穿心莲内酯 HPLC≥98% 20mg
HumanSialicacid,SA 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新对叶百部碱 HPLC≥98% 20mg
Humansolubleansferrieceptor,sTfR人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新苦味素 HPLC≥98% 20mg
Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAIL人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新鲁斯可皂苷元 HPLC≥98% 20mg
HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1β人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新绿原酸 HPLC≥98% 20mg
HumanSomatostatin,SS人生长抑素(SS)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新芒果苷 HPLC≥98% 20mg
HumanSomelysin-1,ST1人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新藤黄酸 HPLC≥98% 20mg
HumanSomelysin-3,ST3人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新西兰牡荆苷 HPLC≥98% 10mg
Humansorbitoldehydrogenase,SDH 人山梨醇脱轻酶(SDH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新知母皂苷BII HPLC≥98% 20mg
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| GV3101(pJlC SA-rep)感受态细胞100ul*10 | 100ul*10 | 根癌农杆菌感受态细胞 |
GV3101(pJlC SA-rep)感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
HFL-I细胞,人胚肺成纤维细胞 鼠肌原细胞,C2C12细胞 T-105BIII型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL盐酸氟西汀(标准品)Fluoxetine Hydrochloride质量规格:HPLC>98%,标准品
SK-N-SH(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2马来酸氟伏沙明Fluvoxamine maleate质量规格:>98.5%,BP2007
HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells 肺成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)马来酸氟伏沙明(标准品)Fluvoxamine maleate质量规格:HPLC>98%,标准品
原代表皮角化细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml福美斯坦Formestane质量规格:>99%
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 福美斯坦(标准品)Formestane质量规格:HPLC≥98.0%,标准品
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1 胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解缓冲液) 1mL甘罗溴铵(标准品)Glycopyrrolate质量规格:含量测定
MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人癌细胞 Human安倍生坦Ambrisentan质量规格:>98%
CHST15 Others Human 人 CHST15 / BRAG 人细胞裂解液 (阳性对照) 安倍生坦(标准品)Ambrisentan质量规格:>98%,标准品
人肺鳞癌细胞;NCI-H520盐酸决奈达隆Dronedarone HCL质量规格:>99%,盐酸盐
GPR56 Others Human 人 GPR56 / TM7LN4 人细胞裂解液 (阳性对照) 决奈达隆(标准品)Dronedarone质量规格:HPLC>98%,标准品
新橙皮苷二氢查尔酮 HPLC≥98% 20mg HumanSerumamyloidP,SAPELISAKit 人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
新穿心莲内酯 HPLC≥98% 20mg HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
新对叶百部碱 HPLC≥98% 20mg HumanSialicacid,SAELISAKit 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
新苦味素 HPLC≥98% 20mg Humansolubleansferrieceptor,sTfRELISAKit人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新鲁斯可皂苷元 HPLC≥98% 20mg Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新绿原酸 HPLC≥98% 20mg HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新芒果苷 HPLC≥98% 20mg HumanSomatostatin,SSELISAKit人生长抑素(SS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新藤黄酸 HPLC≥98% 20mg HumanSomelysin-1,ST1ELISAKit人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新西兰牡荆苷 HPLC≥98% 10mg HumanSomelysin-3,ST3ELISAKit人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
新知母皂苷BII HPLC≥98% 20mg Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 人山梨醇脱轻酶(SDH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
GV3101(pJlC SA-rep)感受态细胞100ul*10HumanSerumamyloidP,SAP 人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新橙皮苷二氢查尔酮 HPLC≥98% 20mg
HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新穿心莲内酯 HPLC≥98% 20mg
HumanSialicacid,SA 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新对叶百部碱 HPLC≥98% 20mg
Humansolubleansferrieceptor,sTfR人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新苦味素 HPLC≥98% 20mg
Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAIL人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新鲁斯可皂苷元 HPLC≥98% 20mg
HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1β人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新绿原酸 HPLC≥98% 20mg
HumanSomatostatin,SS人生长抑素(SS)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新芒果苷 HPLC≥98% 20mg
HumanSomelysin-1,ST1人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新藤黄酸 HPLC≥98% 20mg
HumanSomelysin-3,ST3人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新西兰牡荆苷 HPLC≥98% 10mg
Humansorbitoldehydrogenase,SDH 人山梨醇脱轻酶(SDH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新知母皂苷BII HPLC≥98% 20mg
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