Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*50

Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称：Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*50
规格：100ul*50
分类：表达感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*50操作说明：
1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
CL-00063T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)5×106cells/瓶×2氧氟沙星N-氧化物醋酸盐(非对映)Ofloxacin N-Oxide Acetic Acid Salt (Mixture of Diastereomers)质量规格：美国进口
HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞盐酸阿巴卡韦Abacavir hydrochloride质量规格：美国进口
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9803 人颅盖造骨细胞完全培养基 100mL硫酸阿巴卡韦Abacavir Sulfate质量规格：美国进口
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E7阿巴卡韦羧化物Abacavir Carboxylate质量规格：美国进口
PTPN11 Others Mouse 小鼠 SHP2 / PTPN11 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿巴卡韦5'-1酸盐Abacavir 5'-Phosphate质量规格：美国进口
Acc-3细胞，涎腺腺样囊性癌细胞 人胃癌细胞,BSG823细胞 犬胸腺细胞;cf2Th苯噻啶Pizotifen质量规格：美国进口
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1D3普伐他汀Pravastatin质量规格：美国进口
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-α-羟基普伐他汀内酯3α-Hydroxy Pravastatin Lactone质量规格：美国进口
人骨骼肌细胞HSkMC3-α-羟基普伐他汀钠盐3α-Hydroxy Pravastatin Sodium Salt质量规格：美国进口
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) (S)-3’’-羟基普伐他汀钠盐(S)-3’’-Hydroxy Pravastatin Sodium Salt质量规格：美国进口
盐酸米诺环素(标准品)  Minocycline hydrochloride  质量规格：>98%,BR 大量蛋白样品树脂法去内毒素试剂盒5
盐酸米托蒽醌(进分)  Mitoxantrone HCl  质量规格：进分sigma M6545 大量蛋白样品树脂法去内毒素试剂盒5
盐酸米托蒽醌  Mitoxantrone HCl  质量规格：>98%,USP,可用于细胞培养 大量蛋白样品液相法去内毒素试剂盒5
盐酸米托蒽醌（标准品）  Mitoxantrone HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品 大量蛋白样品液相法去内毒素试剂盒5
咪唑立宾  Mizoribine  质量规格：>98%,细胞培养级 大量蓝藻菌基因组DNA氯化铯萃取试剂盒5
莫吉司坦  Moguisteine  质量规格：>98%,BR 大量全血基因组DNA化试剂盒(20毫升全血)10
莫吉司坦(标准品)  Moguisteine  质量规格：HPLC>98%,标准品 大量全血基因组DNA化试剂盒10
糠酸莫米松  Mometasone furoate  质量规格：>98%,USP31 大量微藻菌基因组DNA萃取试剂盒(高多糖/酚)5
糠酸莫米松(标准品)  Mometasone furoate  质量规格：HPLC>98%,标准品 大量腺病毒沉淀法化试剂盒1
纳他霉素,匹马霉素,那他霉素,游霉素  Natamycin,Pimaricin  质量规格：>90%,BR 大量腺病毒氯化铯化试剂盒5
Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*50大量Lipofusin脂质体细胞转染试剂盒10/100 褪黑素,松果体素（标准品）  Melatonine  质量规格：HPLC>98%,标准品
大量蛋白样品树脂法去内毒素试剂盒5 盐酸米诺环素(标准品)  Minocycline hydrochloride  质量规格：>98%,BR
大量蛋白样品树脂法去内毒素试剂盒5 盐酸米托蒽醌(进分)  Mitoxantrone HCl  质量规格：进分sigma M6545
大量蛋白样品液相法去内毒素试剂盒5 盐酸米托蒽醌  Mitoxantrone HCl  质量规格：>98%,USP,可用于细胞培养
大量蛋白样品液相法去内毒素试剂盒5 盐酸米托蒽醌（标准品）  Mitoxantrone HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品
大量蓝藻菌基因组DNA氯化铯萃取试剂盒5 咪唑立宾  Mizoribine  质量规格：>98%,细胞培养级
大量全血基因组DNA化试剂盒(20毫升全血)10 莫吉司坦  Moguisteine  质量规格：>98%,BR
大量全血基因组DNA化试剂盒10 莫吉司坦(标准品)  Moguisteine  质量规格：HPLC>98%,标准品
大量微藻菌基因组DNA萃取试剂盒(高多糖/酚)5 糠酸莫米松  Mometasone furoate  质量规格：>98%,USP31
大量腺病毒沉淀法化试剂盒1 糠酸莫米松(标准品)  Mometasone furoate  质量规格：HPLC>98%,标准品
Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。