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- CQH117
- 2025年10月30日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SKOV3-GFP
- 库存：
5116
- 供应商：
蒂科生物
- 肿瘤类型：
0
- 细胞类型：
详询
- 品系：
详询
- 组织来源：
器官
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
详询
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
详询
- 器官来源：
人
- 运输方式：
干冰
- 年限：
永久
- 生长状态：
良好
- 规格：
T25
细胞系使用说明书
| 细胞名称 |
SKOV3-GFP 转染GFP的人卵巢癌细胞 |
| 货号 |
H0110 |
| 种属 |
人 |
| 细胞来源 |
从ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
| 生长特性 |
贴壁 上皮样 |
| 培养条件 |
培养基：85%MCCOY’5A+15%FBS（推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-50） 温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳 |
| 传代 |
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液； 2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6； 3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。 |
| 保存 |
冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO (备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：液氮存储 |
| 供应限制 |
经供研究之用 |
| 常见问题及解决方案 |
1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时） 3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。 |
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文献和实验流式课堂 | 细胞带有 GFP 荧光时，如何进行流式凋亡分析？
随着生物研究进入基因时代，转染技术的应用越来越广泛。在此过程中，通常会引入 GFP（绿色荧光蛋白）标签，去验证转染是否成功。 在之前的流式课堂中，我们曾多次提到过流式配色问题。今天，就来带大家看看，带有 GFP 标签的细胞，在流式凋亡检测中，应该如何配色和分析结果。 一、如何选择试剂盒 挑选试剂盒时，需要选择干扰少的荧光组合。GFP 的激发/发射波长为 488/510，通常在流式细胞仪中的检测通道为 FL1。因此，我们不能选择荧光标签为FL1检测通道的凋亡检测试剂盒，如 AF488
Cellometer图像细胞功能分析仪，不仅仅可以进行细胞计数和细胞活力分析，还 可轻松、精确进行细胞周期，凋亡，GFP表达的分析 CellometerK2双荧光细胞活力分析仪和CellometerVISIONCBA双荧光细胞功能分析系统 不仅仅可以快速、准确检测细胞浓度和细胞活力，而且进行多种细胞功能分析。如下图：细胞周期分析通过 FCSExpress流式软件，可轻松获得“类流式”分析数据不仅提供研究者流式结果，还提供可视的细胞图像凋亡分析可进行 AnnexinV,Caspase
qdshlyykqk：我是新手，正在进行肿瘤细胞的GFP转染，有些问题想请教大家。因为在网上看到大家众说纷纭，一时拿不定主意。1、利用转染之前的细胞进行G418筛选来确定最佳筛选浓度，是以1周还是2周完全杀死细胞为标准？有人说以1周的浓度作为将来转染之后的快速筛选阳性细胞的浓度，在对照组的为转染细胞大部分或全部死亡之后，以上述2周时的浓度作为维持浓度。有人说维持浓度应该是筛选浓度的1/2。究竟有没有一个标准，或者怎样做才算是比较标准和可靠的依据。2、如果我以24获96孔板铺板，在进行转染之前
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