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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
360
- 英文名:
SphI
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
200U
特别提示:包括SphI内切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:SphI内切酶
英文名称:SphI
产品货号:GS2124
产品规格:200U
储存条件:冷冻(-20℃)
概述
该限制性内切酶识别5′-ATGCA↓T-3′的酶切位点,并在缓冲液G中具有最佳活性,携带来自发色链霉菌的Sph I克隆基因的大肠杆菌菌株,一般用于酶切。
应用
酶切
使用说明
为了获得100%的活性,应将BSA加入到1×反应混合物中至最终浓度为100μg/ml。使用BSA时不要长时间孵育。
组份
200U/管SphI,10X Buffer G
技术规格
| 识别位点 | 5′-GCATG↑C-3′ |
| 来源 | 携带来自链霉菌克隆基因Sph I的大肠杆菌菌株 |
| 最适缓冲液 | 10X Buffer G(100mMTris-HCl(pH 7.5),100mMMgCl2,500 mM NaCl,1 mM DTT,1mg/ml BSA) |
| 孵育 | 37℃ |
| 酶活定义 | 1U酶是在1h,37℃,总反应体积为50μl时水解1 μg λDNA所需的酶 |
| 储存 | -20℃ |
| 储存条件 | 10 mM Tris-HCl(pH 7.5);100mMNaCl;0.1 mM EDTA;1 mM DTT;100μg/ml BSA;50%甘油 |
| 连接与重切 | 经酶切10倍以上后,90%的DNA片段可以连接并重新结合。 |
| 甲基化影响 | 未检测 |
| 热失活 | 在65℃加热20分钟失去活性 |
我公司销售的SphI内切酶现货供应,SphI限制性内切酶质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)(BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等) 在分子克隆实验中,限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体,要根据载体选择合适的内切酶(当然,使用T载就不必考虑了)。先将引物设计好,然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
):5’―GCATGCGCGCGGCCGGGGAGGCC 含Sac∏,SphI,NotI和SfiI位点。 (5) 电泳鉴定扩增产物; (6) 特异限制性内切酶消化,克隆,转化宿主细胞,序列分析,表达研究等。 PCR第一循环中DNA合成是由anchor-poly(dC)引物(ANpolyC) 和5’端引物引导合成。Anchor的加入有两个作用:一是限定3’末端,防止PCR过程中3’末端可能沿同聚物尾不断的延伸;再则增加酶切位点或其他序列信息,利于基因克隆等操作。锚定-PCR对于分析免疫球蛋白、TCR甚至未知序列基因
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