北京核酸内切酶VIII说明书

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京核酸内切酶VIII说明书，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京核酸内切酶VIII说明书
编号：BTN130642
规格：1000U
英文名：Endonuclease VIII
品牌：百奥莱博
产地：北京
大肠杆菌核酸内切酶Ⅷ既有N -糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N -糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在 AP 位点的3´和5´端切割磷酸二酯键，产生5´磷酸和3´磷酸末端。能被核酸内切酶 Ⅷ 识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二*胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲 。尽管核酸内切酶 Ⅷ与核酸内切酶 III的活性相似，但核酸内切酶 Ⅷ 具有β和δ裂解酶活性，而核酸内切酶 III 只有β裂解酶活性。

产品特点：
➤ 单细胞凝胶电泳(彗星试验)，彗星试验的推荐稀释倍数，1:10⁴〜1:10⁵；
➤ 碱洗脱；
➤ 碱解旋。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

热失活：75℃ 10分钟。

活性定义：1单位指在 10μl缓冲液体系中，37℃条件下，1小时内能够切割1pmol含一个AP位点的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。

AP位点的创建方法如下：37℃条件下，用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理10pmol含单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链2分钟。

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·α2巨球蛋白
编号：BTN130543
英文名称：α2-Macroglobulin
规格：25 Inh.U
α2巨球蛋白(α2-macroglobulin,α2MG或AMG)是存在于脊椎动物血浆中的一种糖蛋白，也是血浆中分子量最大的蛋白质，分子量约为65.2万-80万，具有广谱的蛋白酶抑制活性，可以抑制大部分胞内蛋白酶活性，但是不能抑制组织血管舒缓素、尿激酶、凝血因子Ⅻα、胞内蛋白酶Lys-C。使用过程中应避免添加DTT,DTT会导致α2巨球蛋白发生分解。它对酸敏感，pH4.0以下发生变性。

活力单位定义：一个抑制单位Inh.U是指抑制9.1μg的胰蛋白酶活性的量。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期半年。

·柱式藻类RNA大量提取试剂盒
编号：BTN120504
英文名称：Algae RNA Column large-scale extraction kit
规格：5次
本试剂盒是在本公司柱式藻类RNA提取试剂盒(BTN120503)的大提升级产品，跟柱式藻类RNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1.样品处理量大，最多可以处理50mL液体藻类培养物。
2. 操作简单快捷，整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高，一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0×107个细胞)。非酶细胞破裂法，适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	150ml
溶液D	50ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将50mL液体藻类培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意：溶液A存放时容易产生沉淀，如果有沉淀，用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B，剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意：不要超过5分钟，否则RNA 容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3～5分钟，转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿，充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3～5分钟，转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D，充分混匀。如果上清为10mL，则加入30mL溶液C和10mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合，然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒，弃收集管中的穿透液，然后再加入后一批混合液，重复操作，直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤：将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤：一次洗涤一般足够去除杂质，但如果样品OD260/280 比值不高，可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中，加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测：
注意：普通DNA上样液不含变性剂，更没经过去RNase处理，所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定：
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%；也不要稀释过度，使OD读数在仪器的有效范围之外，这样得到的OD 比值没有意义。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2，最好不要使用TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA 很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。


北京核酸内切酶VIII说明书关键词：BTN130642,Endonuclease VIII,核酸内切酶VIII

BTN120511 CpG甲基转移酶(M.SssI) CpG Methyltransferase(M.SssI)
BTN80204 柱式RNA纯化试剂盒 RNAadsorp RNA Column Purification Kit
SV1470 SHuffle T7 表达 E. coli 感受态细胞
YT256 STAT3凝胶迁移突变探针(1.75μM) STAT3 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
BTN130560 大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys化学感受态细胞 E.coli Rosetta-gami (DE3)pLys Chemical Competent Cell
SY0581 细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒 Cell Senescence β-Galactosidase Staining Kit
SV0723 SphI-HF限制性内切酶 SphI-HF Restriction Endonuclease
WE0244 100bp DNA Ladder
BTN80801 柱式拭子DNA提取试剂盒 Swab DNA column extraction kit
SY0216 FXR-GFP报告基因质粒 FXR GFP Reporter Plasmid
RFT154 2×Tricine上样缓冲液(还原，2×)  2×Tricine Loading Buffer (reducing，2×) 
KFS190 Annexin V-APC/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
ALH190 miRNA荧光定量PCR检测试剂盒 miRNA fluorescent quantitative PCR detection kit
YT562 天冬*酸转*酶 Aspartate Transaminase (Crude Enzyme)
BTN100214 预混型BCIP/NBT溶液 Premixed BCIP/NBT Solution
HR0315 磷酸酶抑制剂混合物片剂 Phosphatase inhibitor mixture tablet
北京核酸内切酶VIII说明书关键词：BTN130642,Endonuclease VIII,核酸内切酶VIII

BTN70905 2%明胶溶液(PCR级) Gelatin Solution，PCR Grade
SV1616 ACP 合成酶
SV0429 Hpy166II限制性内切酶 Hpy166II Restriction Endonuclease
WE0140 实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ) BaReSYBR Mixture
BTN120504 柱式藻类RNA大量提取试剂盒 Algae RNA Column large-scale extraction kit
SY0112 STAT5-Luc荧光素酶报告基因质粒 STAT5 luciferase reporter plasmid 
BTN160697 1×TBS(含5%BSA，0.1%Tween20溶液)
KFS087 4-20%预制胶(205-6.5 kDa分离范围;15个样/胶)
SY0315 RIPA裂解液(弱) RIPA lysis buffer (Weak)
YT402 核酸酶/RNA/DNA清除剂(喷雾清除剂) RNase, DNase, RNA and DNA Away
BTN140648 PCR污染清除剂 DNA Contamination Scavenger
HR0111 线粒体膜蛋白提取试剂盒 Mitochondrial membrane protein extraction kit
YT904 7.5% NaHCO3溶液 7.5% Sodium Bicarbonate Solutioin
YT050 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) SDS-PAGE Sample Loading Buffer，1X
BTN3621 微量DNA助沉剂 DNApp DNA precipitation aid

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