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文献和实验/iPS细胞的长期培养提供了所需的优化ECM包被,并支持在多种无血清/无饲养层人ES/iPS扩增培养基(例如,mTeSR®、PluriSTEM™)中培养人ES/iPS细胞。以下是使用干细胞合格的ECM凝胶基质包被6孔板的一般指南。 所有操作程序均应在生物安全柜中的无菌条件下进行。 1.使用前一天,在2-8 °C冰箱中解冻ECM凝胶基质(CC131)。解冻后,将ECM凝胶始终置于冰上,并使用预先冷却的培养基和移液器,以避免产品凝胶化。 2.用冷的DMEM/F12(D6421)培养基稀释ECM凝胶
人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
Min Lu , Kevin Su , Nick Asbrock , Vi Chu 肺类器官是常用的三维(3D)细胞培养模型,用于研究人类肺部发育和呼吸道疾病,包括病毒感染(SARS-CoV、H1N1、MERS)、囊性纤维化、哮喘/COPD、空气污染暴露和吸烟的影响。与传统的永生化肺细胞系和原代细胞不同,肺类器官包含各种分化的细胞类型,具有复杂的组织结构,更接近于体内组织和功能。 此外,肺类器官可以从少量患者组织或多能干细胞中提取,以创建有助于个性化生物医学研究的活体生物库。 3dGRO™
作为分子生物学领域老牌厂家,Promega同样有很有特色的原核表达系统,不过纵观Promega近年的表现,似乎不满足于此,而是将目光投向了跨物种间的穿梭表达,以及越来越热的体外表达系统了。蛋白纯化,永远是蛋白表达后最令人关注的问题。Promega的 PinPoint™ Xa 表达系统则是巧妙利用了生物素作为亲和纯化的中介――将目的基因克隆到表达载体上的一段“神秘”多肽的DNA序列后面,这段‘神秘’多肽表达后在细胞体内会自然被生物素修饰,所以大肠杆菌表达出的融合蛋白就是已经被生物素标记了的融合
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