pET-Dual-N-GST质粒北京厂家

特别提示：包括pET-Dual-N-GST质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：pET-Dual-N-GST质粒
英文名称：pET-Dual-N-GST Plasmid
产品货号：YT973
产品规格：1μg|100μg

pET-Dual-N-GST是一种用于在大肠杆菌中高效共表达两种目的蛋白的质粒，其中一种蛋白可以带上GST标签(Glutathione S-transferase tag,GST tag)。本质粒包含两个多克隆位点(MCS)，每个多克隆位点前都有一个T7启动子/lac操作子和一个核糖体结合位点(rbs)，因此都可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白的表达。本质粒为氨苄青霉素抗性。

在共表达两个蛋白的复合物时，通常宜把较难表达的基因克隆到第一个多克隆位点，并在其N端引物设计时加入PreScission蛋白酶识别的八肽序列(LEVLFQGP)，宜把较易表达的基因克隆到第二个多克隆位点。这样通过GST柱纯化，可分离纯化获得带有GST标签的蛋白复合物，配合使用百奥莱博生产的PreScission Protease(货号：YT982)4℃酶切过夜，第二天收集穿柱液即可获得蛋白复合物，这为后续进行蛋白复合物的功能检测、蛋白结晶等工作带来了极大的便利。PreScission蛋白酶酶切发生在八肽序列的Q和G之间，因此在酶切去除GST标签的时候会在目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GP。当然，本质粒也可以只在第一个多克隆位点插入目的基因，这样就会仅表达一个含有N端GST标签的目的蛋白。

pET-Dual-N-GST质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
T7 transcription start-1	1
GST-taq coding sequence	71-727
Multiple cloning sites-1(BamH I – NotI)	730-780
T7 promoter-2	838-854
T7 transcription start-2	855
Multiple cloing sites-2(Nde I–XhoI)	922-983
S Tag coding sequence	990-1034
T7 terminator	1086-1133
f1 origin	1171-1618
bla(Ap)coding sequence	1743-2600
pBR322 origin	3361
lacI coding sequence	4555-5637
T7 promoter-1	6028-6044

pET-Dual-N-GST质粒(6044bp)的图谱如下：


pET-Dual-N-GST质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
MCS1-N Primer(626-647):5′-GCTATCCCACAAATTGATAAGT-3′
MCS1-C Primer(832-813):5′-GATTATGCGGCCGTGTACAA-3′
MCS2-N Primer(813-832):5′-TTGTACACGGCCGCATAATC-3′
T7 terminator Primer(1072-1090):5′-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′

使用说明：
1．首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2．100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3．pET-Dual-N-GST质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。

我公司销售的pET-Dual-N-GST质粒北京厂家，pET-Dual-N-GST载体质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。