λDNA北京现货促销

λDNA北京现货促销

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  • ¥170 - 2050
  • 百奥莱博
  • BTN90407A-CAE
  • 北京
  • 2025年07月06日
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      569

    • 英文名

      Lambda DNA

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      低温运输、-20℃保存、有效期一年。纯度:1. OD260nm/280nm>1.8。2. 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保温16小时后,琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃)

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应λDNA北京现货促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:λDNA北京现货促销
    编号:BTN90407A
    规格:5μg
    英文名:Lambda DNA
    品牌:百奥莱博
    产地:北京
    本产品Lambda DNA(λDNA)为λ噬菌体中的DNA,是一种常见的DNA底物,分子量为31.5×106Da/48502bp,浓度为200~500μg/ml。A型为普通Lambda DNA。B型为不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型为非甲基化的cl857 Sam7 λDNA,是从感染的大肠杆菌GM119菌株中分离得到的。该菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作为对DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。

    储存溶液:Tris-HCl(pH8.0)10mM;EDTA 1mM

    储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。

    纯度:
    1. OD260nm/280nm>1.8。
    2. 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。
    3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保温16小时后,琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。
    4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃,2小时)后,在琼脂糖凝胶电泳时出现8条清晰的DNA电泳带。

    欲咨询购买λDNA北京现货促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:

    ·随机引物法DNA探针标记试剂盒
    编号:BTN90603A
    英文名称:Random Primer DNA Labeling Kit
    规格:5次
    本试剂盒是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒,标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下,引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成,可用下面的示意图表示:
    随机引物法DNA探针标记试剂盒
    本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良。

    产品特点:
    1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分,简化了反应加样步骤,提高了标记反应的可重复性。
    2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶,已标记DNA探针不会被酶降解。
    3.快速,最快1小时即可完成标记反应。
    4. 得到的DNA探针比活性高(如果是同位素,可以达到109cpm/μg DNA),检测灵敏度高。
    5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可),DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的,长度在100bp以上均可。
    6. 得到的探针长度在200-400nt之间,可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
    7. 提供三种标记选择,其中BTN90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记,但需自备标记底物;BTN90603B和BTN90603C可分别用于生物素和地高*(代"辛")标记,不需自备标记底物。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    2×A型标记反应液(自备标记物型) 50μl(仅A型有)
    2×B型标记反应液(生物素型) 50μl(仅B型有)
    2×C型标记反应液(DIG型) 50μl(仅C型有)
    dATP,2mM 10μL(仅A型有)
    dTTP,2mM 10μL(仅A型有)
    dGTP,2mM 10μL(仅A型有)
    dCTP,2mM 10μL(仅A型有)
    Klenow exo-聚合酶(2U/μL) 5μl
    超纯水 1ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分:
    成分 用量
    模板DNA 50-150ng
    2×标记反应液(ABC三种之一) 10μl
    超纯水 补水到15μl

    注意:非同位素标记物由于疏水性强,容易与常用的塑料离心管表面非特异性结合,所以一定要使用硅化的塑料离心管。模板DNA并非越多越好,因为模板会在杂交反应中跟标记的探针杂交,竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
    2. 沸水浴5-10分钟,或在PCR仪上100℃加热5-10分钟使DNA模版充分变性,立即放冰上待用。注意:如果PCR仪器不能设置到100℃,99℃加热5分钟也可。
    3.高速离心数秒使所有液体集中在管底,根据试剂盒类型加入下列成份:
    试剂盒类型 成分及用量
    BTN90603A型 dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL,浓度均为2mM)
    自备的2mM dTTP/标记dUTP混合物(见注)1μL
    1μl Klenow exo聚合酶
    BTN90603B型 1μl Klenow exo聚合酶
    4μl超纯水
    BTN90603C型 1μl Klenow exo聚合酶
    4μl超纯水

    注:上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM(在20μL体系中混合液的终浓度为0.1mM,dTTP与生物素或DIG标记的dUTP的比例最好为65:35)。由于空间阻碍,并非标记生物素或DIG标记的dUTP越多灵敏度越高,一般dTTP与标记dUTP的比例在65:35为最佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸,如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP,则用户需要自己摸索其与dTTP之间的最佳比例,如果使用32P标记的dUTP,则比活最好为3000Ci/mmol,浓度为好为10uCi/μL,并且不需要加入dTTP。
    4. 轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
    5. 37℃保温1-20小时。标记效率跟模版量和保温时间相关,具体见下表:
    模版DNA用量 1小时后探针合成量 20小时后探针合成量
    10ng 80ng 900ng
    30ng 150ng 1.35μg
    100ng 350ng 1.65μg
    300ng 750ng 2.2μg
    1μg 1.3μg 2.6μg
    3μg 1.6μng 2.6μg

    6. 加1μl自备的0.5M EDTA(pH8.0)终止反应,立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加热100℃ 5分钟使DNA探针变性成单链,然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测,标记产物将是弥散状态。
     注意:本方法标记核苷酸掺入率极高,因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化,注意不要用酚抽提法纯化非同位素(生物素、DIG和其他等)标记的DNA探针,因为这些标记分子疏水性强,能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失,但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另购非同位素探针柱式纯化试剂盒)。对比活高的同位素探针,由于其极其不稳定,因此应该立即使用,不要长久放置。


    λDNA北京现货促销关键词:BTN90407A,Lambda DNA,λDNA

    SV1418 pMAL-p5X 载体
    SV0061 AscI RE-Mix限制性内切酶 AscI RE-Mix Restriction Endonuclease
    KFS302 SP600125 (JNK抑制剂)
    SY0543 支原体去除试剂1(100X) Antibiotic Solution 1(100X)
    YT921 Bcl-2抑制剂(ABT-737) Bcl-2 Inhibitor
    BTN131125 辣根过氧化物酶(偶联级) Horseradish Peroxidase,Conjugation Grade
    HR0503 细菌活性检测试剂盒-CCK8 Bacterial activity assay kit -CCK8
    SY0180 ER-GFP报告基因质粒 Estrogen Receptor (ER) GFP Reporter Plasmid
    YT265 生物素标记YY1凝胶迁移探针(0.2μM) Biotin-labeled YY1 Probe For EMSA
    BTN80806 大肠杆菌TOP10化学感受态细胞 E.coli TOP10 Chemical Competent Cell
    ALH178 唾液DNA收集提取试剂盒 Saliva DNA collection, preservation,transport and extraction Kit
    YT510 Klenow片段(无外切酶活性) Klenow Fragment,Exo-
    WE0254 BL21(DE3)pLysS感受态细胞 BL21(DE3)pLysS Competent Cell
    BTN60805 中草药DNA提取试剂盒 Chinese herbal medicine DNA extraction kit
    SV1166 T4 噬菌体基因 32 编码蛋白 T4 phage gene 32 encoding protein
    RFT155 PAGE预制胶(8-16%)
    KFS199 Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC) Caspase-3 Fluorescence Metric Assay
    SY0438 人源乙酰化低密度脂蛋白 Human Acetylated Low Density Lipoprotein(Human Ac-LDL)
    λDNA北京现货促销关键词:BTN90407A,Lambda DNA,λDNA


    ·植物DNA提取试剂盒(百万碱基级)
    编号:BTN130939
    英文名称:Plant DNA extraction kit(millions of base)
    规格:10次

    ·重组蛋白G
    编号:BTN131080
    英文名称:Streptococci protein G
    规格:1mg
    本品为重组蛋白G,纯度>90%,带His标签,分子量10kD。

    储存条件:-20℃保存,有效期1年。

    ·酿酒酵母EGY48化学感受态细胞
    编号:BTN140387
    英文名称:E.coli EGY48 Chemical Competent Cell
    规格:10×100μL
     EGY48感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,MATα型,可转化质粒或mating 操作。Transformation marker为his3,trp1,ura3 ,报告基因为LEU2 。本产品经PGBKT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA。

    基因型:MAT α,ura3,his3,trp1,Lex Aop(x6)-LEU2

    储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。

    ·革兰氏阳性菌质粒DNA提取试剂盒
    编号:BTN120601
    英文名称:Gram-positive bacteria plasmid DNA extraction kit
    规格:50次
     EGY48感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,MATα型,可转化质粒或mating 操作。Transformation marker为his3,trp1,ura3 ,报告基因为LEU2 。本产品经PGBKT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA。

    基因型:MAT α,ura3,his3,trp1,Lex Aop(x6)-LEU2

    储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。

    ·大肠杆菌BL21化学感受态细胞
    编号:BTN140428
    英文名称:E.coli BL21 Chemical Competent Cell
    规格:0.1mL*10
    本产品是采用大肠杆菌BL21菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本产品用作表达载体的宿主,适用于毒性蛋白的表达,适用于不是基于T7启动子的表达系统。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达107。
    菌株基因型为:BL21 strain E.coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-)gal。

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

    自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。

    使用方法:
    1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。
    以下实验以50μL感受态细胞为例。
    2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
    3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
    4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
    5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。

    注意事项:
    1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
    3. 涂布剩余的。



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